בדיקה מבוססת זרימה למינרית לחקר האינטראקציות בין לויקוציטים ותאי אנדותל

רלוונטיות תעשייתית למסמך סיכום

בדיקה זו, המבוססת על זרימה למינרית, מאפשרת אפיון דינמי של אינטראקציות בין לוקוציטים לתאי אנדותל תחת מאמץ גזירה פיזיולוגי, ומספקת תובנות קריטיות לגבי מנגנוני גיוס של תאי מערכת החיסון. באמצעות מידול של שלבי ההיצמדות (adhesion), הגלגול (rolling) והמעבר (transmigration), השיטה תומכת בתיקוף מטרות במחקר של מחלות דלקתיות ובהפחתת סיכונים מכניסטיים עבור מועמדים לאימונומודולציה. התוצאות הכמותיות מקלות על פיתוח בדיקות לסריקת תרכובות המווסתות אינטראקציות בין לוקוציטים לתאי אנדותל.

יישומים אסטרטגיים במחקר ופיתוח בביופארמה

גילוי מוקדם ותיקוף מטרה

• ערך מדעי: בחינת היפותזות טיפוליות באמצעות ויזואליזציה של גלגול המתווך על ידי סלקטין והיצמדות חזקה התלויה באינטגרין בתנאי זרימה.
• ערך תפעולי: מאפשר תיקוף תפקודי של מולקולות היצמדות אנדותליאליות וליגנדים של לוקוציטים בהקשר רלוונטי פיזיולוגית.
• ערך ניבוי: תומך בהפחתת סיכונים מכניסטיים על ידי קישור אינטראקציות מולקולריות להתנהגויות תאיים הקריטיות לתגובה החיסונית.

סריקה ופיתוח בדיקה

• מוכנות הבדיקה: מייצרת פלטים כמותיים סטנדרטיים הניתנים לשחזור בנוגע למהירות גלגול של לוקוציטים, תדירות היצמדות והתרחבות תחת מאמץ גזירה מבוקר.
• יישום לסריקה: מכינה שכבות מונו-אנדותל validated לסריקת ספריות תרכובות לצורך זיהוי מודולטורים של גיוס לוקוציטים.
• סקליביליות: תומכת בתהליכי עבודה של דימוג בקיבולת בינונית התואמים למיקרוסקופיית פלואורסצנציה ומערכות לכידה דיגיטלית.

מחקר תרגומי ופרה-קליני

• רלוונטיות למחלה: ממדל מסלולי דלקת וסקולרית אנושית, ומאפשר התאמה של סממנים ביולוגיים תרגומיים למצבי אקטיבציה אנדותלליים.
• המשכיות פרה-קלינית: מגשר בין ממצאי הגילוי לבין תיקוף פרה-קליני באמצעות הערכת השפעות של תרכובות על פוטנציאל נדידה (transmigration) של לוקוציטים.
• החלטות מותאמות סיכון: מספק מידע לקביעת קריטריונים של המשך או הפסקת הניסוי (go/no-go) על בסיס ויסות תלוי-מינון של דינמיקת היצמדות תחת זרימה.

שילוב תהליכי עבודה וצנרת עיבוד (Pipeline)

הבדיקה משתלבת ברצף הגילוי, החל מסריקת מעורבות המטרה (target engagement), דרך אופטימיזציה של תרכובות מובילות (lead optimization) ועד להערכת יעילות פרה-קלינית, ובמיוחד בתחומים טיפוליים של אימונומודולציה ונוגדי דלקת.

• ביולוגיה של גילוי: תומך בבדיקת היפותזות של מנגנוני אינטראקציה בין לויקוציטים לאנדותל ובהבהרת נתיבים של צירי איתות של selectin/integrin.
• סריקה: מספק מערכות אנדותליאליות מוכנות לבדיקה עם מדדי היצמדות כמותיים להערכה מהימנה של תרכובות בסריקות ראשוניות ומשניות.
• אנליטיקה: מספק פרמטרים מדידים הכוללים rolling flux, חוזק היצמדות ומדד פריסה (spreading index) כדי לאפשר ניתוח השוואתי בין תנאים ניסיוניים.
• מחקר תרגומי: מקשר למודלים פרה-קליניים על ידי שימור פיזיולוגיה אנדותליאלית רלוונטית לבני אדם וספציפיות של תת-אוכלוסיות לויקוציטים.
• שימוש חוזר ארגוני: מבסס פלטפורמה ניתנת לשימוש חוזר עבור תוכניות גילוי המתמקדות באימונולוגיה, ביולוגיה של כלי דם ובדלקות לאורך פרויקטים מרובים.

השפעה תפעולית וארגונית

• ערך מדעי: מגביר את הביטחון החזוי בתיקוף המטרה על ידי הפחתת העמימות המכניסטית במסלולי גיוס לוקוציטים.
• ערך תפעולי: סטנדרטיזציה של תנאי מאמץ גזירה ופרוטוקולים להכנה תאית לשיפור השחזוריות בין אתרים וצוותים שונים.
• ערך אסטרטגי: משפר את איכות קבלת ההחלטות לגבי המשך התהליך (go/no-go) על ידי אספקת נתונים על תגובה חיסונית תפקודית בשלב מוקדם יותר של שרשרת הגילוי.
• השפעה על פורטפוליו: מאפשר תיעדוף מותאם סיכונים של מועמדים לאימונומודולציה על בסיס פרופילי אינטראקציה אנדותליאליים.

שיקולי יישום

• דורש מומחיות בתרביות תאים, דינמיקת זרימה ומיקרוסקופיה פלואורסצנטית לצורך הכנת שכבה אחת של תאי אנדותל וסימון לוקוציטים.
• תלוי במערכות של תאי זרימה, משאבות מזרק ומערכי פרפוזיה בבקרה טמפרטורית לשמירה על מאמץ גזירה פיזיולוגי ותנאי 37°C.
• מחייב סטנדרטיזציה בין-צוותית של בידוד לוקוציטים, יעילות הסימון ופרוטוקולי הפעלה של אנדותל לקבלת תוצאות עקביות.
• כולל שיקולי התאמה בעת הרחבה לסוגים שונים של תת-סוגי לוקוציטים, מקורות אנדותל שונים או מצבי הפעלה פתולוגיים.
• מוגבל בשל הצורך בציוד דימוי ייעודי ובמומחיות בכימות אינטראקציות תאיות דינמיות תחת זרימה.

שאלות נפוצות בביופארמה