אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
אימונולוגיה
0 צפיות • 4:34 דק׳ • July 8th, 2025
התחל עם צלחת מרובת בארות המכילה תרחיף חד-תאי של תאים מיאלואידים ברשתית העכבר, כולל מיקרוגליה, מונוציטים ונויטרופילים.
מיקרוגליה - או תאי חיסון פגוציטים ברשתית, מציגים פלואורסצנטיות עקב חלקיקים ביולוגיים המסומנים בפלואורופור ממקור פטרייתי, המוזרקים מראש תוך זגוגית.
צנטריפוגה והוספת נוגדנים לקולטן FC, החוסמים אתרי אינטראקציה לא ספציפיים".
הציגו קוקטייל של נוגדנים המסומנים בפלואורופור המכוונים לחלבוני פני השטח CD11b, Ly6C ו-Ly6G, המקיימים אינטראקציה עם תאים מיאלואידים המבטאים אותם.
הסר נוגדנים לא קשורים. טפל בפרופידיום יודיד, המחלחל דרך ממברנות פגומות, ומכתים אך ורק תאים מתים.
בזרימה ציטומטרית, עורר פרופידיום יודיד כדי לא לכלול תאים מתים ולזהות את התאים החיים שאינם פלואורסצנטיים.
האירו את התאים בלייזר סגול; תאים חיים נרגשים מסמלים את התאים המיאלואידים המבטאים CD11b.
לאחר מכן, האירו בלייזר אדום, ועוררו את הפלואורופור האדום כמעט רחוק בתוך תאים חיוביים ל-CD11b, מה שמצביע על מונוציטים המבטאים Ly6C ונויטרופילים המבטאים Ly6G.
לעורר את התאים באמצעות לייזר כחול; פליטת הקרינה הירוקה משאר התאים החיוביים ל-CD11b מאשרת את ספיגת המיקרוגליה של חלקיקים פלואורסצנטיים.
שלוש שעות לאחר הזרקה תוך זגוגית, השתמש במלקחיים בזווית של 45 מעלות כדי ללחוץ בעדינות על העפעף כדי לחזק את גלגל העין. מקם את המלקחיים מ
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים