שימוש בבדיקות מתח מבוססות DNA כדי להעריך את כוחות הקולטן המופעלים על ידי תאי מערכת החיסון

התחל עם כיסוי זכוכית פונקציונלית עם ננו-חלקיקי זהב מעוגנים בפוליאתילן גליקול.

הוסף בדיקות מתח סיכת ראש DNA המכילות סיכת ראש DNA הכלאה עם שני אוליגונוקלאוטידים בזרועות מנוגדות.

גדיל הליגנד כולל פלואורופור וביוטין, בעוד שגדיל העוגן מכיל מרווה וקבוצת תיול. במערך זה, המרווה מדכא את הקרינה.

בדיקות ה-DNA נקשרות לננו-חלקיקי הזהב, ומעוגנות לכיסוי הזכוכית.

הכניסו סטרפטווידין, באינטראקציה עם מולקולות הביוטין של גדילי הליגנד.

הוסף ליגנדים ביוטיניים הנקשרים למולקולות סטרפטווידין קשורות מראש.

כיסו את הכיסוי עם תאי T חיוביים ל-CD8; הקולטנים שלהם מקיימים אינטראקציה עם ליגנדים משותקים, ויוצרים אתר אינטראקציה בין קולטן-ליגנד.

אינטראקציה זו יוצרת כוח הפותח את מבנה סיכת הראש של ה-DNA, מפריד את הפלואורופור מהמרווה ומקדם פליטת פלואורסצנטיות.

הציגו גדילי נעילה שאינם פלואורסצנטיים המקיימים אינטראקציה עם מקטעים פרושים של הבדיקות כדי לשמר את אות הקרינה.

כמת את הקרינה כדי להעריך את כוחות הקולטן המופעלים על ידי תאי החיסון.

כדי להתחיל, הניחו כיסויים של 25 מילימטר על מתלה פוליטטרפלואורואתילן בכוס של 50 מיליליטר, ושטפו את הכיסויים שלוש פעמים על ידי טבילתם במים. מערבבים כמויות שוות של אתנול ומים, ומוסיפים 40 מיליליטר מתמיסה זו לכוס המכילה את המתלה ואת הכיסויים. לאחר מכן, אטמו את הכוס באמצעות סרט פרפילם.

נקה את ה