אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
אימונולוגיה
0 צפיות • 3:49 דק׳ • July 8th, 2025
קח שכבות דו-שכבתיות של שומנים הנתמכים בחרוזים, או BSLBs, חרוזי סיליקה המצופים בשכבות דו-שכבתיות של שומנים מצומדים עם קומפלקסים אנטיגניים של פפטיד-MHC, מולקולות הידבקות וגירוי משותף, הפועלות כתאים סינתטיים המציגים אנטיגן.
דגירה עם תאי T.
TCRs נקשרים לפפטידים אנטיגניים ב-BSLBs, אשר, יחד עם אותות מעוררים משותפים, יוצרים סינפסה חיסונית, המפעילה תאי T.
קשירה זו מפעילה מפלי איתות תוך תאיים, גורמת לסידור מחדש של אקטין ויוצרת מיקרו-אשכולות בסינפסה המכילה מולקולות הידבקות ואיתות.
תאי T משחררים שלפוחיות טרנס-סינפטיות מועשרות ב-TCRs, מולקולות קו-גירויים ותכולת גרגירים ליטיים לתוך הסינפסה, ונקשרים ל-BSLBs.
יש לקרר בהדרגה את התרבות המשותפת כדי להפריד בין BSLBs לתאי T.
צנטריפוגה והשליכו את הסופרנטנט. השתמש במאגר המכיל חלבון כדי לחסום את אתרי הקישור החופשיים על המשטחים.
צנטריפוגה וטיפול ב-BSLBs ובתאי T עם נוגדנים מצומדים פלואורופור הנקשרים למולקולות איתות ספציפיות וגירוי משותף.
באמצעות ציטומטריית זרימה, נתח אותות פלואורסצנטיים מתאי BSLBs ותאי T כדי לכמת את התפוקה הסינפטית.
השעו מחדש 500,000 BSLBs לבאר ב-200 מיקרוליטר של מאגר HBS/HSA. העבירו 100 מיקרוליטר של BSLBs לבאר לצלחת חדשה של 96 בארות U-bottom כדי ליצור שכפול, כך שהכמות הסופית של BSLB לבאר היא 250,000. סובב את ה- BSLBs ב -300 פעמים גרם למשך
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים