אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
אימונולוגיה
0 צפיות • 3:57 דק׳ • July 8th, 2025
קח צלחת מרובת בארות המכילה חד-שכבות של תאי יונקים.
בארות בדיקת זרעים עם נגיף הרפס סימפלקס. בארות בקרה חסרות את הנגיף.
הנגיף נצמד להפראן סולפט על פני התא ומופנם באמצעות אנדוציטוזיס.
זיהום בנגיף מעורר הפרשת הפרנאז, אשר מבקעת את הפראן סולפט וחושפת קולטנים פטרייתיים ספציפיים.
דגירה משותפת של התאים עם צינורות נבט סטפילוקוקוס זהוב וקנדידה אלביקנס.
בתאים נגועים בנגיף, דלדול הפראן סולפט מעכב אינטראקציה חיידקית תוך קידום אינטראקציות עם קולטנים פטרייתיים, ומונע לוקליזציה משותפת של חיידקים-פטריות.
בתאי ביקורת, חיידקים מקיימים אינטראקציה עם הפראן סולפט, בעוד שפטריות נקשרות לקולטנים זמינים.
קו-לוקליזציה מיקרוביאלית זו יוזמת היצמדות - הצעד הראשון ביצירת ביופילם.
לאחר הדגירה, הסר חיידקים לא קשורים. כיסוי עם מאגר ליזה, משחרר חיידקים ופטריות למדיה.
מורחים את ליזאט התא על צלחות המכילות אמצעי גידול. דגירה להיווצרות מושבה.
ירידה במושבות חיידקים עם עלייה מקבילה במושבות פטרייתיות מצביעה על עיכוב המושרה על ידי וירוס של לוקליזציה משותפת של חיידקים-פטריות והתחלת ביופילם.
כדי לבצע בדיקת ביופילם פולימיקרוביאלית, זרעו צלחות של 96 בארות עם 200 מיקרוליטר של 2 פעמים 10 לתאי HeLa החמישיים למיליליטר. נענעו את הצלחות ב-37 מעלות צלזיוס למשך 30 עד 45 דקות, לפני הדגירה ב-5% פחמן דו חמצני ב-37 מעלות צלזיוס למשך 18 שעות
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים