בדיקת היצמדות לשלב מוצק להערכת היווצרות ביופילם

קח צלחת מרובת בארות עם תחתית שטוחה עם בארות המכילות חיידקים במצע גידול או חיידקים במצעי גידול בתוספת מלח מרה.

מלחי המרה גורמים ללחץ, גורמים לנזק לתאים ומשחררים DNA וחלבונים. ביומולקולות אלו מצפות את קרקעית הבאר, ומאפשרות לחיידקים השורדים להיצמד למשטח המוצק.

החיידקים המחוברים מתרבים, יוצרים מיקרו-מושבות ומייצרים משרה עצמית - או מולקולות איתות כימיות, המאפשרות תקשורת חיידקית.

תקשורת זו מעוררת חיידקים להתיישב וליזום ייצור של חומרים פולימריים חוץ-תאיים או EPS, וליצור ביופילם.

לאחר הדגירה, הסר את המדיה כדי לחסל חיידקים צפים חופשיים.

הכניסו כתם סגול קריסטל המקיים אינטראקציה עם הפפטידוגליקן של דופן התא החיידקי, ומעניק לו צבע סגול.

הסר כתם עודף וייבש. כיסוי עם אתנול כדי להמיס סגול קריסטל מדופן התא החיידקי, ולשנות את צבע התמיסה.

צבע עז יותר בבארות שטופלו במלח מרה מאשר בבארות לא מטופלות מאשר היווצרות ביופילם באמצעות היצמדות לשלב מוצק.

ראשית, סמן שני צינורות של 1.5 מיליליטר כ-TSB ו-TSB בתוספת BS. לאחר מכן, הוסף 1 מיליליטר של TSB או TSB בתוספת BS לצינורות המתאימים.

לאחר מכן, יש לחסן את הצינורות ב -20 מיקרוליטר תרבית לילה בדילול של 1:50. לאחר מכן, הוסף 130 מיקרוליטר של אמצעי בקרה לא מחוסנים לכל אחת משלוש הבארות בצלחת סטרילית, שקופה, בעלת תחתית שטוחה שטופלה בתרבית רקמות, 96 בארות. זה יהיה הפקד ה