אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
אימונולוגיה
0 צפיות • 2:49 דק׳ • July 8th, 2025
התחל עם צלחת מרובת בארות המכילה ביופילם חיידקי - חיידקים עטופים בתוך החומר הפולימרי החוץ-תאי המגן או EPS.
שאפו את המדיום כדי להסיר חיידקים שאינם נדבקים ולשטוף.
טפל בבארות המכילות ביו-פילם עם בופר בלבד, בופר עם גלוקוז, בופר עם מלחי מרה, או בופר עם גלוקוז ומלחי מרה.
טיפולי בופר וגלוקוז תומכים בשחרור אנזימים חיידקיים המפרקים את ה-EPS של הביופילם.
התוצאה היא פירוק הביופילם, ומשחרר את החיידקים.
בעוד שמלחי מרה ושילוב של מלחי מרה וטיפולי גלוקוז מחקים מצבי לחץ ושומרים על חיידקים בתוך ה-EPS המגן.
מעבירים את הסופרנטנט מכל באר לצלחת מרובת בארות טרייה.
אתר סופרנטנטים מדוללים על צלחות אגר ודגירה.
ספרו מושבות חיידקים וקבעו את פיזור החיידקים לכל טיפול.
פיזור גבוה יותר עם טיפולי בופר וגלוקוז בהשוואה לטיפולים במלחי מרה מעיד על פירוק הביופילם.
רשום את ערכי ה-OD600 מלוח הביופילם הלילה בקורא הלוחות על ידי הגדרת הפקד כריק. לאחר מכן, שאפו את מדיום התרבות באמצעות קו ואקום מבלי להפריע לאוכלוסיית הדבקים על משטח הפלסטיק. שוטפים בעדינות את הבארות פעמיים עם 200 מיקרוליטר PBS סטרילי.
לאחר שטיפה עם PBS ב -130 מיקרוליטר של PBS שחומם מראש, PBS עם גלוקוז, PBS עם מלחי מרה ו- PBS עם מלחי מרה וגלוקוז לכל אחת משלוש הבארות. לאחר מכן דגרו את הצלחת בחום של 37 מעלות צלזיוס למשך 30 דקות. לאחר 30 דקות, הוציאו את הצלחת מהחממ
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים