אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
אימונולוגיה
0 צפיות • 2:39 דק׳ • July 8th, 2025
קח תאי סרטן הערמונית והזריק אותם תת עורית לעכבר עירום מורדם ומדוכא חיסון.
היעדר תגובה חיסונית מאפשר לתאים המוזרקים לשרוד ולהתרבות וליצור גידול.
תאי הגידול מבטאים יתר על המידה אנטיגן ממברנה ספציפי לערמונית או PSMA, חלבון על פני התא.
קח נוגדנים ספציפיים ל-PSMA מצומדים ל-Radiotracer והזריק אותם תוך ורידי לזנב העכבר הנושא את הגידול.
נוגדנים מגיעים לתאי הגידול ונקשרים ל-PSMA, ומסמנים את הגידול.
הנח את העכבר המורדם בטומוגרפיה של פליטת פוזיטרונים או סורק PET וקבל סריקה.
התמונה שהופקה מציגה את התפלגות הרדיו-טרסר, ומדגישה אזורים של ספיגת נוגדנים גבוהה, התואמים את מיקום הגידול.
בעכברים עירומים אתימיים זכרים, השתיל תת עורית 5 x 106 תאי סרטן הערמונית LNCaP, מה שמאפשר להם לגדול ל-xenograft בגודל 100 עד 150 מילימטר מעוקב. שלושה עד ארבעה שבועות לאחר החיסון, הגידולים צריכים להיות מוכנים.
לצורך הדמיה, יש לדלל את הרדיו 89Zr-DFO-J591 לריכוז של 1 מיליקורי למיליליטר בתמיסת מלח סטרילית של 0.9%. לאחר מכן, הזרקו 200 מיקרוליטר של תמיסת 89Zr-DFO-J591 לווריד הזנב הצדדי של העכברים נושאי הקסנוגרפטים.
בנקודת זמן ההדמיה הרצויה, הרדמו את העכבר בתערובת של 2% איזופלורן: גז חמצן. הנח את העכבר על מיטת סורק PET של בעלי חיים קטנים. יש לוודא את ההרדמה בשיטת צביטת הבוהן, ולמרוח משחה וטרינרית על עיני העכבר כדי למנוע ייבוש במהלך ההרדמה.
שמור על הרדמה במהלך הסריקה באמצעות תערובת איזופלורן:גז חמצן 1%. לאחר מכן, רכשו את נתוני ה-PET עבור העכבר באמצעות סריקה סטטית עם מינימום של 40 מיליון אירועים מקריים באמצעות חלון אנרגיה של 350 עד 700 קילו-אלקטרון וולט וחלון תזמון צירוף מקרים של שש ננו-שניות.