איתור נוגדנים אנטי-גליקניים במחזור הדם עם מערך גליקן מודפס

התחל עם גליקוצ'יפ פונקציונלי הכולל תת-מערכי גליקן מודפסים המאורגנים בבלוקים של מערכים.

כל נקודה בתת-המערך מייצגת גליקן מובהק - פולימר מבוסס פחמימות עם שינויים בהרכב החד-סוכר, אורך השרשרת ודפוס ההסתעפות.

טפל בגליקוצ'יפ עם מאגר חוסם כדי לחסום אתרי אינטראקציה לא ספציפיים.

העבירו את הגליקוצ'יפ והכניסו סרום עכבר מדולל למאגר בתוספת פעילי שטח כדי למזער את צבירת הנוגדנים. דגירה תחת תסיסה.

תסיסה מקדמת פיזור אחיד של הסרום, ומאפשרת קשירה סלקטיבית של נוגדנים אנטי-גליקנים לגליקנים ספציפיים על סמך מאפיינים מולקולריים מובחנים.

שטפו עם ריכוזים הולכים ופוחתים של חוצץ המכיל חומר פעילי שטח כדי להפריע לקשירה ולשטיפה לא ספציפית.

כיסו את הגליקוצ'יפ בנוגדנים משניים מצומדים לביוטין נגד עכברים, באינטראקציה עם נוגדנים אנטי-גליקניים קשורים מראש ושטפו.

הציגו סטרפטווידין עם תווית פלואורופור, הנקשרים לנוגדנים משניים ביוטיניליים. שוטפים ומסירים עודפי תמיסה.

סרוק את הגליקוצ'יפ ובדוק אם יש כתמי פלואורסצנטיות מובהקים במיקומים שונים המרמזים על נוגדנים במחזור ספציפיים לגליקן בסרום.

הכן את המאגר #1 דרך מאגר #4 כמתואר בפרוטוקול הטקסט. להכנת הגליקוצ'יפס והדגימות, הניחו את קופסת האחסון עם השקופיות על השולחן עד שהם מגיעים לטמפרטורת החדר. פתח את הקופסה והעביר את הגליקוצ'יפ לתא הדגירה, אותו יש כבר להתמזג בנייר סינון רטוב כד