טכניקה לזיהוי זנים ציאנובקטריאליים באמצעות שבב מיקרו-מערך נוגדנים

התחל עם שבב מיקרו-מערך נוגדנים המודפס עם נוגדנים ספציפיים.

כל נקודה מכילה נוגדן ייחודי כנגד זן ציאנובקטריאלי ספציפי.

טפל בשבב עם מאגר חוסם כדי למזער אינטראקציות לא ספציפיות.

הרכיבו את השבב בקלטת הכלאה בעלת מספר בארות.

הכניסו דגימה סביבתית לבארות ודגרו אותה בתנאים אופטימליים.

הדגימה מכילה חיידקים שונים, כולל זנים ציאנובקטריאליים שונים, המקיימים אינטראקציה עם נוגדנים ספציפיים על השבב המודפס. שטפו את השבב כדי להסיר את החיידקים הלא קשורים.

הוסף תערובת נוגדנים המכילה נוגדנים אנטי-ציאנובקטריאליים המסומנים בפלואורופור המקיימים אינטראקציה עם אנטיגנים ספציפיים על התאים הציאנובקטריאליים המתאימים. הסר נוגדנים לא קשורים.

לפרק את הקסטה, לשטוף ולייבש את השבב ואז לסרוק אותו.

פלואורסצנטיות בנקודות ספציפיות מסמלת נוכחות של זנים ציאנובקטריאליים מסוימים בדגימה.

הגדר את השקופית בקלטת היברידיזציה של 3 על 8 באר מיקרו-מערך בהתאם להוראות הספק. לחלופין, לאחר שינוי דפוס הדפסת הנוגדנים, הגדר קלטת מותאמת אישית, כמו זו המוצגת כאן, או פשוט השתמש בשקופיות כיסוי להגדרה.

לאחר הרכבת שקופיות וקלטות, פיפטה עד 50 מיקרוליטר מכל תמצית דגימה או דילול שלה במאגר דגירה מיצוי לכל באר של הקסטה. לחלופין, טען דגימות למכשירי דגירה אחרים או פשוט השתמש בשקופיות כיסוי.

כבקרה ריקה, פיפטה 50 מיקרוליטר של מאגר TBST-RR לתוך לפחות שתי ב