זיהוי ומדידה של פפטיד מטרה באמצעות חיישן ביולוגי קיבולי של אימונופרוב

0 צפיות5:15 דק' • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

התחל עם חוט פלטינה מצופה פרפלואורואלקוקסי מורכב עם שכבת פולידופמין.

השרו את הגשושית הזו בתמיסה המכילה נוגדנים ספציפיים לפפטיד מטרה, המשתקעים על פולידופמין ויוצרים אימונופרוב.

שטפו והניחו את החיסון בתא זרימה עם אלקטרודה טחונה של כסף כלוריד, ויוצרים מעגל.

ראשית, הציגו את המאגר והפעילו מתח להפעלת החיסון, מה שמאפשר לו לתפקד כסוללה או קבל, ולאחסן אנרגיה כמטען חשמלי.

רשום את האות החשמלי כדי ליצור את קו הבסיס.

כעת, חשוף את החיישן הביולוגי לתמיסה המכילה את פפטידי המטרה.

פפטידים אלה נקשרים לנוגדנים בבדיקה, וגורמים לשינוי במטען המקומי ובאנרגיה המאוחסנת בחיישן הביולוגי.

הקלט את האות החשמלי. עלייה באות מצביעה על נוכחות פפטיד המטרה, בעוד שגודל האות הזה מתואם עם ריכוז פפטיד המטרה.

ראשית, חותכים חוט פלטינה מצופה פרפלואורואלקוקסי באורך 25 סנטימטר. לאחר מכן, בעזרת אזמל, הפשיטו כ -5 מילימטרים של ציפוי פרפלואורואלקוקסי מקצה אחד, היזהרו לא לחתוך לתוך חוט הפלטינה. כעת, הכנס את הקצה המופשט של חוט הפלטינה לתוך פין מחבר זכר מצופה זהב בגודל 1 מילימטר. לאחר מכן, בעזרת צבת מחט, כווץ את שיני סיכת המחבר סביב הקצה המופשט של חוט הפלטינה, והלחם את חוט הפלטינה לפין המחבר המצופה זהב.

לאחר מכן, הכינו את תמיסת הדופמין על ידי הוספת 50 מיליגרם דופמין הידרוכלוריד ב -50 מיליליטר של 10 מילי-מולרי PBS, עם pH 6, וערבבו תוך ערבוב. לאחר המסה מוחלטת של הדופמין, הנח את קצה חוט הפלטינה בכלי המכיל את ה-PBS הטרי בתוספת דופמין. חבר את אלקטרודת דיסק כלוריד הכסף לתעלת ההארקה בראש tage. לאחר מכן, הנח את דיסק כלוריד הכסף בכלי המכיל PBS וחוט פלטינה בתוספת דופמין.

לפני שתמשיך הלאה, חבר שאנט תיל לתעלות הייחוס של שלב הראש. פתח את תוכנת קליטת הנתונים האינטראקטיבית, והגדר פרוטוקול פוטנציאל פקודת אלקטרודפוזיציה של שן מסור על ידי הגדרת פוטנציאל ההתחלה במינוס 0.6 וולט, פוטנציאל הקצה ל-0.65 וולט, קצב הסריקה הוא 0.04 וולט לשנייה ומשך התצהיר ל-420 שניות.

לאחר השלמת שקיעת הפולידופמין, הסר את כדור הקרקע של כלוריד הכסף ואת קצה חוט הפלטינה מהכלי. הנח את קצה החוט לתוך מיקרו-צינור המכיל PBS של pH 7.4 למשך 2 עד 5 דקות וודא שקצה החוט אינו נוגע בצדדים או בתחתית המיקרו-צינור. לאחר מכן, הכינו את תמיסת הנוגדנים על ידי שילוב הנוגדן המעניין עם PBS של pH 7.4, ביחס של 1 ל-20, בכלי בגודל מתאים.

לאחר מכן, יש להשרות את קצה הפולידופמין של אלקטרודת הפלטינה בתמיסת נוגדנים למשך שעתיים בטמפרטורת החדר, ולוודא שקצה חוט הפלטינה תלוי בתמיסה ולא מונח על המשטח הפנימי של המיקרו-צינור. הנח את הקצה הפונקציונלי של האימונו-פרוב הקיבולי לתוך תא הזרימה, הקפד לא להפריע לקצה האלקטרודה בשום צורה, שכן פעולה זו עלולה לפגוע בקצה החושי של הבדיקה.

לפני הניסוי הראשון, בצע ריצה סטנדרטית של TBS כדי להתנות את החיסון הקיבולי, ועבור פרוטוקול המתח, הגדר את פוטנציאל הצעד החיובי ל-110 מילי-וולט, פוטנציאל צעד שלילי למינוס 5 מילי-וולט, משך צעד של 20 אלפיות שנייה ומשך הרכישה ל-600 שניות.

לאחר מכן, צור את תמיסת הפפטיד המעניינת, באמצעות אותה TBS. כדי לשמור על הרכב הסופר-פוסט, הגדר מערכת סעפת שבה ניתן להחליף את הסופר-פוסט בין TBS ל-TBS בתוספת פפטיד. השתמש בפרמטרים סטנדרטיים של TBS, והגדר את פרוטוקול רכישת הנתונים של חישת פפטידים על ידי הגדרת משך הרכישה ל-360 שניות.

16:01

חוקר תא פיטום הפרשת הגרגרים; מיוסינתזה לExocytosis

סרטונים קשורים

0 צפיות

09:41

קונאפוקלית הדמיה של Neuropeptide Y-pHluorin: טכניקה להמחיש אינסולין אקסוציטוזה גרגר ב איונים מאתר ואנושי ללא פגע

סרטונים קשורים

0 צפיות

09:22

חקירה ספקטרומטרית מסה רבת פנים של נוירופפטידים בקלינקטס ספידוס

סרטונים קשורים

0 צפיות

06:58

איתור מהיר של מבחני אחידים ביולוגית באמצעות מערכת מגנטית biosensing אפנון

סרטונים קשורים

0 צפיות

05:00

הדמיית תהודה פלסמונית מקומית על פני השטח לאיתור הפרשות חלבונים מתא בודד

סרטונים קשורים

0 צפיות

07:59

Assay עקידת התפוקה גבוה MHC II לניתוח כמותי של פפטיד אפיטופים

סרטונים קשורים

0 צפיות

08:46

לשון אלקטרונית יצירת דפוסי הכרה רציפה לניתוח חלבון

סרטונים קשורים

0 צפיות

15:27

קביעת קינטיקה מחייב אנטיגן נוגדן גבוהה זיקה באמצעות ארבע פלטפורמות biosensor

סרטונים קשורים

0 צפיות

07:58

זיהוי רגיש מאוד, כמותית של חלבונים ושל שלהם איזופורמים בשיטה התמקדות לגירויי כאב נימי

סרטונים קשורים

0 צפיות

08:22

זיהוי העדינה של סמנים ביולוגיים באמצעות הטבעה מולקולרית מבוסס ביוסנסור קיבולי

סרטונים קשורים

0 צפיות

עודכן לאחרונה: 1 אוגוסט 2026