אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
אימונולוגיה
0 צפיות • 7:32 דק׳ • July 8th, 2025
כדי לזהות סמן ביולוגי חלבוני הקשור למחלה, קח צלחת בדיקה חיסונית.
הצלחת מכילה מטריצות הפרדה וערימה מלאות מראש הנדרשות להפרדת חלבון מבוססת גודל.
טען את החלבונים ואת ריאגנטים לבדיקה חיסונית לבארות צלחת נפרדות.
התחל את הריצה בתוך מנתח CEI. המחסנית הנימים במנתח שואבת את המטריצות ליצירת ג'ל בתוך כל נימי.
לאחר מכן הנימים שואבים את החלבונים. במהלך האלקטרופורזה, החלבונים נודדים ונפרדים על סמך המשקל המולקולרי שלהם.
המנתח מכניס אור UV, ומשתק את החלבונים בנימים.
מאגר הכביסה מסיר את המטריצות והחלבונים הלא קשורים. לאחר מכן המאגר החוסם זורם פנימה, וחוסם אתרי אינטראקציה לא ספציפיים.
המנתח מציג נוגדנים ראשוניים הנקשרים לסמן הביולוגי, ואחריהם נוגדנים משניים מצומדים לפרוקסידאז המקיימים אינטראקציה עם הנוגדנים הראשוניים.
שוטפים ואז מוסיפים את המצע הכימילומינסנציה. פרוקסידאז מחמצן את המצע ופולט זוהר.
מדוד את עוצמת הזוהר והשווה אותה לתקן החלבון לזיהוי סמנים ביולוגיים.
לאחר איסוף 100 מיקרוליטר של ליזאטים של טסיות דם אנושיות מחולי ALS ונבדקים בריאים, מלא תבניות שנוצרו בתוך הבית עבור פריסת הנימים והכנת הדגימה. טבלת הכנת תערובת הדגימה היא דינמית ותחשב אוטומטית כמה נפח יש להסיר מהמקור. הנח את כל ריאגנטים לבדיקה על קרח, למעט החבילה הסטנדרטית שאמורה להישאר בטמפרטורת החדר.
כדי להכין את תערובת המאסטר הפלואורסצנטי
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים