מדידת יעילות פאגוציטית של מקרופאגים באמצעות פרימקווין וטיפול פוטודינמי

התחל עם צלחת מרובת בארות המכילה מקרופאגים עכבריים דבוקים - או תאי חיסון פגוציטים.

הציגו תרחיף תאים פטרייתי של קריפטוקוקוס, אינטראקציה עם קולטני מקרופאגים והפנמה באמצעות פגוציטוזיס.

הפגוזום מתמזג עם הליזוזום ויוצר פגוליזוזום. הסביבה החומצית של הפגוליזוזום מעדיפה הישרדות פטרייתית וכפל.

הכניסו ריכוז גבוה של פרימקין - רגיש לאור, לבארות הבדיקה, בעוד שהבקרה חסרה את הרגישות לאור. דגירה כדי להקל על ספיגת פרימקווין על ידי מקרופאגים.

חשוף את הצלחת לאור אולטרה סגול לטיפול פוטודינמי או PDT.

בבאר הבדיקה, פרימקווין יוצר קטיונים רדיקליים המקיימים אינטראקציה עם חמצן מולקולרי, ומייצרים מיני חמצן תגובתיים, או ROS.

ROS גורמים למוות פטרייתי, בעוד שאנזימים נוגדי חמצון של מקרופאגים מנטרלים ROS ומונעים נזק לתאים.

לחדור את המקרופאגים ולשחרר תאי פטרייה.

מורחים את תכולת התאים המדוללים על צלחות אגר סלקטיביות, ומניבים מושבות פטרייתיות מובהקות.

פחות מושבות על לוחית הבדיקה בהשוואה לביקורת מצביעות על יעילות פגוציטית משופרת של מקרופאגים עקב טיפול פוטודינמי בפרימקווין.

התחל בהשעיה של קו תאים של מקרופאג עכברי במדיום RPMI 1640 שלם כפי שהוזכר בפרוטוקול הטקסט. הוצא 100 מיקרוליטר של תרחיף תאים זה לבארות של צלחת תרבית סטרילית עם תחתית שטוחה של 96 בארות. דגרו את הצלחת למשך הלילה בחממה.

למחרת, הוציאו את הצלחת מהחממה. החלף