פוטואימונותרפיה כמעט אינפרא אדומה לסילוק תאים ממוקד בתרביות תלת-ממד מעורבות

קחו תרבית של ספרואידים מעורבים טיפות תלויות, שהם אגרגטים של תאים הטרוגניים המורכבים מתאי מטרה המבטאים קולטני גורם גדילה וחלבון פלואורסצנטי, בעוד שתאים שאינם מטרה מבטאים חלבון פלואורסצנטי בצבע שונה.

החלף את המדיה במצומד נוגדן-בולם פוטו המורכב מנוגדנים חד שבטיים ספציפיים לתא מטרה וצבע בולם אור.

דגירה כדי להקל על קשירת נוגדנים לקולטני תאי המטרה.

שטפו את הספרואידים במדיה כדי להסיר צימודים לא קשורים, ולאחר מכן העבירו אותם לכלי עם תחתית זכוכית עם מדיה להקרנת אור.

חשוף את הספרואידים לאור אינפרא אדום קרוב לפוטואימונותרפיה, מה שמעורר תגובה פוטוכימית של צבע בולם האור על תאי המטרה, וגורם לנזק מהיר לקרום התא ולמוות של תאים.

תהליך זה מבטל תאי מטרה מבלי לפגוע בתאים שאינם מטרה.

מעבירים את הספרואידים לצלחת תלויה טרייה. הוסף מדיה ודגירה לצמיחת כדורים.

תחת מיקרוסקופ פלואורסצנטי, היעדר פלואורסצנציה של תאי מטרה מעיד על חיסול תאים יעיל, בעוד שנוכחות של פלואורסצנציה של תאים שאינם מטרה מאשרת את האופי הסלקטיבי של פוטואימונותרפיה.

כדי להכין את תרבית התאים התלת מימדית המעורבת, הוסף 1 מיליליטר מים סטריליים לקטע מאגר הצלחת של צלחת טיפה תלויה של 96 בארות. לאחר מכן, צלח יחסים שונים של סוגי התאים המעניינים במדיום תרבית התאים המתאים ב-5000 תאים לכל 50 מיקרוליטר מדיום לבאר למשך 5 עד 7 ימים באינקובטור לח ב-37 מעלות