אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
אימונולוגיה
0 צפיות • 5:23 דק׳ • July 8th, 2025
התחל עם תאי דם טבורי אנושיים, כולל תאי גזע המטופויאטיים CD34+, או HSCs.
הוסף נוגדנים כדי לחסום קולטני Fc תאיים, ולמנוע קשירה לא ספציפית של חרוזים מגנטיים ספציפיים ל-HSC.
הציגו את החרוזים המגנטיים המצופים נוגדנים המכוונים ל-CD34+ HSCs. צנטריפוגה והשליכו את הסופרנטנט.
השעו מחדש את התאים במאגר. העבירו אותם דרך מפריד מגנטי כדי לשמור על HSCs הקשורים לחרוזים; תאים לא מאוגדים זורמים דרכם.
הסר את השדה המגנטי כדי לאסוף את ה-HSCs.
צנטריפוגה ולהשעות מחדש את התאים במדיום גידול. צלחת את התאים ודגירה.
המדיום מכיל גורמי גדילה וציטוקינים המקדמים הישרדות והתרחבות HSC.
קצרו את התאים. מוסיפים מדיום מקפיא, מעבירים לקריוביאל ומקפיאים.
כדי ליצור מערכת חיסון אנושית, או HIS, מודל עכבר, הפשירו את ה-HSCs. הוסיפו אותם למדיום מחומם מראש.
צנטריפוגה והשעיית התאים במאגר.
התאים מוכנים להזרקה לגור עכבר חסר חיסון ליצירת מודל HIS.
כדי להתחיל, יש להשעות מחדש את גלולת התאים החיובית ל-CD34 שבודדה מדם טבורי ב-300 מיקרוליטר של מפריד תאים מגנטיים לכל 1 x 108 תאים. הוסף 100 מיקרוליטר של מגיב חוסם FcR לכל 1 x 108 תאים, ואחריו 100 מיקרוליטר של חרוזים מגנטיים חיוביים CD34 לכל 1 x 108 תאים, ודגירה בטמפרטורה של 4 מעלות צלזיוס למשך 30 דקות.
לאחר מכן, הוסף 5 מיליליטר של מאגר מפריד תאים מגנטיים לכל 1 x 108 תאים וסובב ב -360 גרם למ
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים