טכניקה ליצירת מודל עכבר קסנוגרפט אנושי המושתל על ידי PBMC אנושי

קחו למשל עכבר מדוכא חיסון שיש לו רק נויטרופילים ומונוציטים כתאים חיסוניים מתפקדים.

הזרקה תוך-צפקית של ציקלופוספאמיד, תרופה המכוונת לתאי אב חיסוניים.

התרופה נכנסת לתאי אב חיסוניים המתרבים באופן פעיל ומקשרת חומצות גרעין, וגורמת למוות של תאים. מוות של תאי אב מוביל לדלדול תאי החיסון.

מתן דרך הפה דיסולפירם, תרופה היוצרת תוספת עם ציקלופוספאמיד, ומפחיתה את תופעות הלוואי הנגרמות על ידי ציקלופוספאמיד.

להזריק תת עורית תערובת של תאי גידול אנושיים ותאים חד-גרעיניים בדם היקפי, או PBMCs, בתערובת חלבון ג'לטינית מתאימה.

תערובת החלבון יוצרת ג'ל, המחקה את המטריצה החוץ-תאית הפיזיולוגית, ולוכדת את תאי הגידול.

דלדול תפקודי של תאי חיסון מאפשר לתאי הגידול להתרבות וליצור כלי דם חדשים, ולהפוך לקסנוגרפט גידול מוצק.

במקביל, תאי T מה-PBMCs המוזרקים חודרים לגידול.

קסנוגרפט הגידול מציג צמיחה ותאי T חודרים לגידול, ויוצר מודל עכבר קסנוגרפט אנושי.

לדלדול תאים מיאלואידיים, יש לספק באופן תוך-צפקי 100 מיליגרם לק"ג ציקלופוספאמיד, ולספק דרך הפה 125 מיליגרם לק"ג דיסולפירם לעכברים נקבות NOD/SCID בנות 6 עד 8 שבועות פעם ביום למשך יומיים. 24 שעות לאחר המנה השנייה של ציקלופוספאמיד ודיסולפירם, יש להשעות 5 x 10⁶ PBMC אנושי טרי מבודד ו-2.5 x 10⁶ תאי קו גידול אנושי ב-200 מיקרוליטר PBS בתוספת 50% מטריג'ל לכל חיה, ומזריקים את כל הנפח תת עורי לאגף הימני של כל חיית ניסוי. מדוד ורשום את נפח הגידול הראשוני פעמיים בשבוע למשך 4 עד 6 שבועות.