יצירת מודל עור פצוע של שחלה Ex Vivo נגוע בפתוגן חיידקי
אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
אימונולוגיה
0 צפיות • 2:13 דק׳ • July 8th, 2025
קח קטע ביופסיית עור מעוקר מראש המתקבל ממצחו של כבש במדיום נטול אנטיביוטיקה.
החתך מורכב מאפידרמיס חיצוני ושכבת דרמיס מתחתיו.
הסר את המדיום והשתמש במאגר כדי לשטוף את הקטע.
ערוך חתך עגול בקטע והסר את השכבה העליונה. זה שובר את המחסום, ויוצר מצע פצע בעור.
העבירו את החלקים הפצועים לתוספת קרום חדירה בצלחת מרובת בארות המכילה מדיום נטול אנטיביוטיקה.
הכניסו תרחיף של חיידקים פתוגניים על מיטת הפצע ודגרו.
במהלך הדגירה, מצע הפצע מספק משטח רקמה לחיבור חיידקים ואת חומרי המזון לתמיכה בצמיחת חיידקים.
זה מאפשר להתרבות ולהפיץ את החיידקים על פני מיטת הפצע, וליצור זיהום.
כדי להדביק את דגימת העור, הכינו צלחת טרייה של 24 בארות עם 400 מיקרוליטר של מדיה נטולת אנטיביוטיקה מחוממת מראש, והוסיפו את התוספות של 24 בארות באמצעות מלקחיים סטריליים. הסר את המדיה מדגימות העור, שטוף אותן עם 500 מיקרוליטר PBS סטרילי והסר את הכביסה.
השתמש במלקחיים סטריליים כדי להחזיק בעדינות את הדגימה לתחתית הבאר. השתמש בביופסיית אגרוף של 4 מילימטר כדי לחדור דרך דגימת העור לעומק גס של 1 עד 2 מילימטרים, וליצור דש פצע מרכזי. לאחר מכן, השתמש באזמל להב מספר 15 ובמלקחיים סטריליים של רקמת אליס כדי להסיר את השכבה העליונה של דש הפצע.
לאחר שכל הדגימות נפצעו, העבירו אותן ל-24 בארות באמצעות מלקחיים סטריליים. פיפטה 15 מיקרוליטר של החיסון החיידקי למי
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים