אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
אימונולוגיה
0 צפיות • 2:56 דק׳ • July 8th, 2025
הכן עכבר מורדם מהונדס גנטית חסר ביטוי ציטוקין אינטרלוקין-15.
גלחו את עור האגף הגבי ומרחו קרם להסרת שיער כדי לחסל את כל פירי השיער שנותרו, מה שמקל על עירוי DNA משופר לעור בשלבים הבאים.
עקר את פני העור הגבי וסמן את אזור היעד להעברת DNA.
מרחו טיפה קטנה של DNA פלסמיד המקודד אינטרלוקין-15 על המשטח המסומן.
בעזרת צרור מחטי דיקור, דוקרים שוב ושוב את משטח העור המסומן.
תנועת הדקירה של צרור המחט מתנודדת בעדינות על פני העור, ומשחררת את התאים המתים של שכבת העור החיצונית ביותר.
יתר על כן, המחטים המתנודדות מגרדות את קרומי הפלזמה של התאים, מקדמות אקופיקציה או העברת DNA בתיווך דיקור לתאים, כולל קרטינוציטים ותאים דנדריטים.
כעת, אפשר לעכבר להתאושש.
תאים שעברו טרנספטציה מוצלחת בעור מייצרים חלבוני אינטרלוקין-15.
לאחר הרדמת העכבר, יש למרוח משחת עיניים וטרינרית על עיניו למניעת יובש. לאחר מכן, גלחו את העור בגב החיה ומרחו קרם אפילציה כדי להמיס חלבוני קרטין בפירי השיער הנותרים. לאחר האפילציה יש לנגב את השמנת בכותנה ספוגה במים.
בעזרת צמר גפן סטרילי ספוג באתנול 70%, יש לחטא את פני העור ולסמן את אזור עור היעד בתבנית שהוכנה בעבר. מרחו 10 מיקרוליטר מתמיסת ה-DNA המכילה 10 מיקרוגרם של DNA פלסמיד על אזור העור הרצוי. כדי לחזק את העכבר, החזק את מכשיר הדיקור בניצב לעור, ונקב שוב ושוב את המשטח המיועד 100 פעמים במשך 30
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים