בדיקה להערכת ההשפעות האנטי-סרטניות של סופרנאטנט נטול תאי לקטובצילוס

קח צלחת מרובת בארות המכילה ספרואידים של סרטן המעי הגס במדיום גידול.

הספרואידים הם אגרגטים תלת מימדיים של תאים סרטניים הדומים למיקרו-סביבת הגידול הפיזיולוגית.

הסר את מצע הגידול והוסף ריכוזים הולכים וגדלים של סופרנטנט נטול תאים של לקטובצילוס, או LCFS, הסופרנטנט התרבית המתקבל מתרבית של לקטובצילוס, חיידק של מערכת העיכול.

LCFS נטול תאי חיידקים אך מכיל מטבוליטים פעילים עם פעילות אנטי-סרטנית המופרשים על ידי החיידקים.

מטבוליטים חיידקיים ב-LCFS מקיימים אינטראקציה עם תאים סרטניים בספרואיד, גורמים לאפופטוזיס ומובילים למוות של תאים.

הנזק לתאים גורם לשיבוש במורפולוגיה הספרואידית.

באמצעות מיקרוסקופ, בדוק את הספרואידים שטופלו ב-LCFS כדי לראות עלייה במוות התאים עם עליית הריכוז של LCFS, מה שמצביע על הפעילות האנטי-סרטנית תלוית המינון של המטבוליטים החיידקים.

לטיפול ב-LCFS, יש לדלל באופן סדרתי את תמיסת מלאי ה-LCFS המופשרת המוכנה במדיום גידול טרי לריכוזים של 25%, 12.5 ו-6% והשתמש בפיפטה של 200 מיקרוליטר כדי להסיר בזהירות כמה שיותר סופרנטנט מכל באר של תרביות קו תאי סרטן המעי הגס המצופים.

לאחר מכן הוסיפו בעדינות 200 מיקרוליטר של מצע הגידול בתוספת LCFS בשלוש פעמים לכל קבוצה של תאים סרטניים, והחזירו את הצלחת לחממה למשך 24 עד 48 שעות נוספות.