אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
אימונולוגיה
0 צפיות • 2:46 דק׳ • July 8th, 2025
קח עוברי דג זברה סיסטיק פיברוזיס מורדמים הרגישים לזיהום Pseudomonas aeruginosa.
להזריק חלבון פלואורסצנטי המבטא Pseudomonas aeruginosa לכלי דם מרכזי, צינור Cuvier.
להעביר עוברים מוזרקים לצלחת עם מדיה וחומר חוסם פיגמנטציה כדי לעכב פיגמנטציה של העובר ולדמיין חיידקים. דגירה.
חיידקים מוזרקים נעים במחזור הדם ופולשים לאיברים.
בתגובה, מערכת החיסון המארחת מופעלת, משחררת מתווכים מעודדי דלקת ומגייסת תאי חיסון.
לאחר הדגירה, הזריק קוקטייל של פאג'ים אלימים כנגד Pseudomonas aeruginosa לתוך צינור Cuvier והעביר את העוברים לצלחת המכילה מדיה ואת החומר חוסם הפיגמנטציה.
דגירה. פאג'ים מדביקים את החיידקים ומשתמשים במנגנון מארח כדי לייצר חלקיקי פאג'ים חדשים.
חיידקים משחררים פאג'ים המדביקים חיידקים שכנים, וכתוצאה מכך תגובה פרו-דלקתית מופחתת.
באמצעות מיקרוסקופ פלואורסצנטי, התבונן בפלואורסצנטיות החיידקית המופחתת בעוברי דג הזברה לאורך זמן, מה שמעיד על יעילות פאג'ים נגד Pseudomonas aeruginosa.
לאחר 26 שעות לאחר ההפריה, טען מחט מיקרו-הזרקה עם כ-5 מיקרוליטר של חיסון P. aeruginosa, והכנס את המחט בגב לנקודת ההתחלה של צינור Cuvier, שם הצינור מתחיל להתפשט על שק החלמון. הזרקו 1 עד 3 ננוליטר של חיסון PAO1 לעובר, וודאו שהנפח מתרחב ישירות בתוך הצינור, ונכנס למחזור הדם.
לאחר ההזרקה, העבירו את העובר לאחת משתי צלחות פטרי ח
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים