בניית מודל עכבר אנושי עם חסינות מהונדסת נגד HIV

הכן עכבר מושתל מורדם עם מדוכאי חיסון חמור.

בצע חתך כדי לחשוף את הכליה וליצור חור בקפסולת הכליה.

קח מחט שתל המכילה רקמת תימוס עוברית אנושית ותאים שמקורם בכבד עוברי המרחפים בתערובת חלבון ג'לטיני.

התאים כוללים תאי גזע המטופויאטיים מהונדסים, או HSCs, המבטאים קולטני אנטיגן כימריים, או CARs, המכוונים נגד HIV.

השתל את תרחיף התאים ואת רקמת התימוס מתחת לקפסולה, ולאחר מכן סגור את החתך.

לאחר מכן, הזרקו רטרו-אורביטלי את ה-HSCs המבטאים CAR ואפשרו לעכבר להתאושש.

בכליה, תערובת החלבון הג'לטינית מתפלמרת למטריצה, ושומרת על HSCs באתר ההשתלה.

מטריצת HSCs נודדת לבלוטת התימוס, ומתמיינה לתאי T אנושיים מתפקדים.

בינתיים, HSCs המוזרקים רטרו-אורביטלית מגיעים למח העצם ומתמיינים לתאי B אנושיים מתפקדים, מונוציטים ותאי NK.

מודל העכבר עם מערכת חיסון אנושית נגד HIV מוכן כעת.

שופכים את נתחי התימוס והמדיום מהבקבוק לכלי של 60 מילימטר. צננו כמה קצות פיפטה עם תזוזה חיובית על ידי הנחתם בצינורות פתוחים של 1.5 מיליליטר עם מכסה בורג על קרח. כמו כן, הניחו את כדורי התא ונפח של תערובת חלבון ג'לטיני, כגון מטריג'ל, על קרח.

להרדים את העכברים המקבלים עם חומר הרדמה בהזרקה על פי פרוטוקול מאושר לבעלי חיים. בדוק את רמת ההרדמה של העכבר על ידי סחיטת כף. היעדר תגובה לצביטה מעיד על מישור הרדמה כירורגי.

גלח את הצד השמאלי של כל עכבר מהמותן