העברה פומית של תאי שמרים מותמרים למערכת החיסון של עכבר

התחל עם צינור אוראלי המכיל תרחיף של שמרים אוקסוטרופיים שעברו טרנספורמציה גנטית שאינם מסוגלים לייצר נוקלאובסיס אורציל.

הכנס את צינור הפה לפיו של עכבר מאופק והוביל אותו למטה אל הקיבה.

יש לתת את תרחיף השמרים ישירות לקיבה, מה שמאפשר לו להגיע בסופו של דבר למעי הדק.

המעי הדק מכיל תאי אפיתל, עם כתמי פייר עשירים בתאי חיסון.

תאים מיקרו-קפואים, תאי אפיתל מעיים מיוחדים ליד כתמי פייר, בולעים את תאי השמרים ומפנימים אותם לשלפוחית.

שלפוחיות אלו נעות על פני התאים ומשחררות תאי שמרים לתוך כתם פייר הבסיסי.

בודד את מדבקת פייר ממעי העכבר שהוקרב וקבל תרחיף תאים אחיד.

תרבית תרחיף תאים זה על מדיום סלקטיבי לשמרים המכיל אורציל.

שמרים אוקסוטרופיים מנצלים את האורציל ומתרבים ליצירת מושבות, ומאשרים את מסירתם של תאי שמרים שעברו טרנספורמציה למערכת החיסון של מעי העכבר.

לאחר הכנת תרביות שמרים על פי פרוטוקול הטקסט, השתמש בהמוציטומטר כדי לקבוע את ריכוז התאים, והתאם ל -10 עד התאים התשיעי למיליליטר. גלולה את התאים על ידי צנטריפוגה ב -2,500 פעמים גרם למשך שלוש דקות. לאחר מכן, שפכו את הסופרנטנט, והשעו מחדש את התאים על ידי הוספת הנפח המתאים של מים סטריליים, ופיפטינג בעדינות למעלה ולמטה.

תקן מחט מד מתאימה על מזרק סטרילי של 1 מיליליטר, וטען את דגימת השמרים, תוך ביטול בועות אוויר. טען מזרק נוסף במים סטריליים כדי לפגוע בעכברי