אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
אימונולוגיה
0 צפיות • 4:16 דק׳ • July 8th, 2025
התחל עם עכבר חסר חיסון NOD מאופק שחסר תאים חיסוניים ונוטה לסוכרת.
עכבר זה מוזרק מראש עם תאי בטא לבלב טרנסגניים המייצרים אינסולין ומבטאים אנזימי לוציפראז.
קח מזרק המכיל טחול שטופל מראש שמקורו בעכבר סוכרתי. הטחול כולל תאי T אוטוראקטיביים עם יכולת לזהות את פפטידי האינסולין.
יש לתת את הטחול הזה לווריד הזנב של העכבר.
הטחול מסתובב ומגיע ללבלב, שם תאי ה-T האוטוראקטיביים מזהים את פפטידי האינסולין על תאי הבטא והופכים לפעילים.
תאים מופעלים אלה משחררים מולקולות ציטוטוקסיות, ויוזמים הרס תאי בטא באמצעות תגובתיות עצמית.
לאחר מכן, הזריק מצע לוציפראז לצפק העכבר. המצע מתפזר באזור זה ונכנס לתאי הבטא.
בתוך התאים, המצע מקיים אינטראקציה עם אנזימי הלוציפראז, ומייצר זוהר.
באמצעות מערכת הדמיה ביו-לומינסצנטית, צלם תמונות במרווחי זמן קבועים
ירידה הדרגתית בזוהר מעידה על הרס של תאי בטא טרנסגניים עקב תגובתיות עצמית.
לחמם את גופו של הנמען הבוגר, עכברי NOD-scid על ידי שימוש במנורת חום למשך 5 עד 10 דקות כדי להרחיב את הוורידים. יש להשעות מחדש את תמיסת הטחול לפני כל הזרקה. עבור כל עכבר, שאב 100 מיקרוליטר מתרחיף הטחול שחומם מראש לתוך המזרק. ודא שאין בועות אוויר.
לאחר מכן, הנח את העכבר בהתקן הריסון לפני שתלכוד את זנבו ביד הלא דומיננטית. אתר את אחד משני ורידי הזנב הצדדיים. סובב בעדינות את הזנב במידת הצורך. נגב את הזנב
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים