אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
אימונולוגיה
0 צפיות • 6:08 דק׳ • July 8th, 2025
תרבית השרתה תאי גזע פלוריפוטנטיים על שכבת הזנה של תאי סטרומה על מטריצת ג'לטין.
שכבת ההזנה מחקה את הסביבה החוץ-תאית הטבעית, ומנחה את התמיינות תאי הגזע לאורגנואידים בצורת כיפה המכילים תאי אב המטופויאטיים.
הוסף אנזימים כדי לנתק את התאים שעברו תרבית משותפת.
העבירו את התאים לכלי מצופה ג'לטין טרי להדבקה של תאי סטרומל.
אסוף את תאי האב ההמטופויאטיים שאינם דבוקים במדיום התמיינות.
תרבו אותם על שכבת הזנה טרייה כדי לקדם התמיינות תאי אב לתאי T חיוביים כפולים עם קולטני CD4 ו-CD8 ותאי T שליליים כפולים חסרי שני קולטנים.
העבירו את התאים לצינור. דגרו עליהם עם חרוזים מגנטיים הנושאים נוגדנים ספציפיים ל-CD4 המתייגים באופן סלקטיבי את תאי ה-T החיוביים הכפולים.
השתמש במפריד מגנטי כדי לבודד את התאים החיוביים הכפולים ולתרבית אותם על שכבת הזנה טרייה.
תוסף עם תערובת ציטוקינים ונוגדנים כדי לעורר את התאים, לגרום לוויסות נמוך של קולטן CD4 ולקדם את ההתמיינות שלהם לתאים חיוביים בודדים CD8.
הכינו מנות OP9-delta-1 מג'לטין שבוע לפני התרבות המשותפת עם IPSCs אנושיים. הוסיפו 4 מיליליטר של 0.1% ג'לטין לשלוש מנות תרבית תאים חדשות, ודגרו אותן למשך 30 דקות בחום של 37 מעלות צלזיוס. לאחר הדגירה שואבים את הג'לטין ומוסיפים 8 מיליליטר של מדיה OP9 לכל מנה. מעבירים צלחת קונגלונט אחת של תאי OP9-delta-1 לשלושה כלים מצופים ג'לטין.
לא
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים