מידול פגיעה עצבית בתאי עצב גרגיריים צרבלריים ראשוניים בעכבר

התחל בתרבית של נוירונים ראשוניים של גרגירי המוח הקטן של העכבר.

הוסיפו ריכוזים גבוהים של N-מתיל-D-אספרטט, או NMDA, אגוניסט לקולטן נוירוטרנסמיטר מעורר, וגליצין, קו-אגוניסט. דגרו על התרבות.

NMDA וגליצין נקשרים לאתרים שלהם בקולטני NMDA, מה שמוביל לגירוי יתר וגורם לזרם מסיבי של יוני סידן.

הסידן התוך תאי המוגבר מפעיל פוספוליפאזות תלויות סידן, אשר מפרקות את הפוספוליפידים של קרום התא, וכתוצאה מכך נזק לממברנה.

בנוסף, סידן תוך-תאי מפעיל פרוטאזות המשפילות חלבונים תאיים.

רמות הסידן הגבוהות גורמות גם ללחץ ופיצול מיטוכונדריה, מה שמוביל לשחרור מיני חמצן תגובתיים, או ROS, וגורם למתח חמצוני.

יתר על כן, סידן תוך-תאי מפעיל DNases, אשר יחד עם ROS גורמים לנזק ל-DNA, ובסופו של דבר מביאים למוות עצבי.

החלף את המדיום במדיום טרי ללא NMDA וגליצין כדי לעצור את מפל האיתות.

מודל הפגיעה העצבית הנגרמת על ידי NMDA מוכן לניתוח נוסף.

כדי לגרום לאקסיטוטוקסיות עצבית עם NMDA, לאחר שבעה ימים במבחנה, טפל בתאי העצב של גרגירי המוח הקטן עם 100 NMDA מיקרומולרי ו-10 גליצין מיקרומולרי למשך שעה. לאחר מכן, החלף את המדיום במדיום מותנה מהתרבויות המקבילות ללא טיפול. ריכוז זה מביא למוות של 50% תאים 24 שעות לאחר הטיפול.