אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מדעי המוח
0 צפיות • 3:15 דק׳ • July 8th, 2025
קחו חולדה מורדמת ומרחו חומר הרדמה על העין שלה כדי להקהות רפלקסים.
חתוך שפם וחטא את האזור סביב העין כדי למנוע זיהום.
תחת מיקרוסקופ, מהדקים את העפעף התחתון כדי להבליט את העין, וחושפים את הווריד האפיסקלרלי.
וריד זה מתחבר לחדר הקדמי דרך תעלת שלם ורשת טרבקולרית ליציאת הומור מימי.
הכנס מיקרו-מחט עם מי מלח היפרטוניים לווריד החשוף.
להזריק את מי המלח ולעקור דם. בצע זריקה שנייה מול הראשונה לקבלת אפקט אחיד על פני העין.
המלח נכנס לרשת הטרבקולרית.
ריכוז המלח הגבוה גורם ללחץ אוסמוטי, מה שמוביל למוות של תאים ולהצטלקות רקמות. צלקת זו חוסמת את זרימת ההומור המימי דרך הרשת, ומגבירה את הלחץ התוך עיני.
הלחץ המוגבר פוגע בתאי הגנגליון ברשתית, שהם נוירונים הנושאים מידע חזותי למוח. הנזק מוביל לגלאוקומה, מצב הגורם לאובדן ראייה.
בהליך זה, לאחר הרדמת החיה עם קוקטייל KAX, בדוק את הרפלקסים על ידי מתן צביטות לרגליו או לזנבו כדי לוודא שהחיה מחוסרת הכרה. לאחר מכן, חתוך את השפם במספריים. לאחר מכן, יש להרוות אפליקטור כותנה בתמיסת בטדין ולנגום את האזור סביב עין הניסוי.
מתחת למיקרוסקופ, השתמש בהמוסטט כדי להדק את העפעף התחתון על מנת לבלוט את העין, לחשוף את הווריד האפיסקלרי ולהגביל את תנועת העין. לאחר מכן, חודרים בזהירות את הווריד האפיסקלרי עם המיקרו-מחט בזווית שבין 10 ל-20 מעלות לווריד. ניקוב בווריד מצליח כאשר נצפה שהדם נכנס לקצה המחט.
הזרקו לאט 50 מיקרוליטר מי מלח לווריד. הוורידים יהפכו לבנים כאשר המלח מסתובב דרך כלי הדם, אך אזורים מסוימים עשויים לשמור על מראה אדום כדם.
השלב הקריטי ביותר בהליך זה מתרחש במהלך הזרקת שתי תמיסות מי מלח טוחנות. הכרחי שהלבנה בכלי הדם תתרחש כדי להבטיח תוצאה מוצלחת. שמירה על מחט יציבה בזווית של 20 מעלות חיונית להליך זה.
לאחר מכן, בצע זריקה שנייה לווריד כדי להבטיח נזק יסודי לשכבת תאי הגנגליון ברשתית. תוך דקות ספורות ניתן לראות מראה עכור מובהק דרך קשתית העין כאשר המלח מסתובב במערכת כלי הדם.