בידוד סיבי עמילואיד מתמצית רקמת המוח

0 צפיות • 4:38 דק׳ • July 8th, 2025

קחו תמצית רקמת מוח של עכבר המכילה חלבונים שאינם עמילואידים וסיבי עמילואיד, אגרגט חלבון בלתי מסיס.

מוסיפים סוכרוז מוצק ומערבבים, ומגדילים את צפיפות התמיסה.

העבירו אותו וצנטריפוגה כדי להפריד חלבונים צפופים יותר מפסולת.

השליכו את הסופרנטנט, השעו מחדש את הגלולה במאגר ריכוז סוכרוז גבוה יותר, ערבבו וצנטריפוגה.

אוספים את השכבה העליונה המכילה כמה סיבי עמילואיד בשפופרת טרייה, מוסיפים חוצץ כביסה ומערבבים.

כעת, השליכו את השכבה האמצעית והעבירו את הגלולה המועשרת בסיבי עמילואיד לצינור המכיל את חלק השכבה העליונה לבידוד מקסימלי.

צנטריפוגה את השברים המשולבים והשליכו את הסופרנטנט. הוסיפו חוצץ עיכול ודגרו כדי לפרק חלבונים שאינם עמילואידים באופן בלעדי.

צנטריפוגה והסר את הסופרנטנט. שטפו את הגלולה כדי להסיר שאריות חלבונים מעוכלים.

השעו מחדש את הגלולה במאגר מסיס על בסיס סוכרוז המכיל חומר ניקוי הממיס את החלבונים הנותרים שאינם עמילואידים.

צנטריפוגה, הסר את הסופרנטנט והשהה מחדש את סיבי העמילואיד המבודדים.

התחל בהנחת אזור רקמת מוח שזה עתה נותח או הוקפא בצינור של שני מיליליטר המכיל שישה עד שמונה חרוזי קרמיקה ומאגר הומוגניזציה קר כקרח. לאחר מכן, טוחנים את הרקמה באמצעות הומוגנייזר טחנת חרוזים ב-4,000 סל"ד, עם שני מחזורים של 30 שניות דופק הפעלה וכיבוי. כעת, הוסיפו תשעה מיליליטר של חוצץ הומוגניזציה קר כקרח למיליל

צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים

התחברות

גלה סרטונים נוספים

סנטריפוגציה במדרג צפיפות