קביעת רעילות הנגרמת על ידי ננו-חלקיקים בתאי עצב באמצעות מיקרוגליה כביו-חיישן חלופי

קח תרביות מיקרוגליה בצלחת מרובת בארות המכילה מדיה.

החלף מחצית מהמדיה בבאר הבדיקה במדיה המכילה ננו-חלקיקי כסף, ובבאר הבקרה במדיה של הרכב. דגירה.

המיקרוגליה מפנימה את הננו-חלקיקים, מופעלת ומשחררת ציטוקינים פרו-דלקתיים.

העבר את מדיית הרכב ואת המדיה הממוזגת המכילה ציטוקינים אלה למסננים המותקנים על צינורות איסוף.

צנטריפוגה להסרת הננו-חלקיקים, תוך שמירה על הציטוקינים.

הפוך את המסננים לצינורות איסוף חדשים, צנטריפוגה ואסוף את המדיה. הוסף מדיה חדשה.

לאחר מכן, קחו תרביות עצביות היפותלמוסיות.

החלף מחצית ממדיית באר הבקרה במדיית הרכב ואת מדיית באר הבדיקה במדיה ממוזגת. דגירה.

הציטוקינים נקשרים לקולטנים על נוירונים היפותלמוסיים, ומפעילים מסלולי איתות הגורמים למוות עצבי.

מוסיפים רזזורין ומדגרים.

בתאים חיים, אנזימי דהידרוגנאז מפחיתים את הרזזורין הפלואורסצנטי החלש לרסורופינה פלואורסצנטית.

מדוד את הקרינה.

פלואורסצנטיות מופחתת מצביעה על מוות עצבי מוגבר בהיפותלמוס, מה שמרמז על רעילות עצבית הנגרמת על ידי ננו-חלקיקים.

כדי להתחיל, אספו 200 מיקרוליטר של מדיום סופרנטנט מכל צלחת היטב, והעמיסו אותו על מסנן שיסיר את הננו-חלקיקים, המונחים על צינור מיקרו-צנטריפוגה.

חשוב לזכור שבעת סינון הננו-חלקיקים, גודלם, צורתם וריכוזם ישפיעו על יעילות הסינון, ולכן רצוי לבדוק את הסינון מראש.

כעת, סובב את הצינורות כלפי מטה ב-14