פגיעה מכנית בזחלי דרוזופילה עצבים סגמנטליים כדי לגרום לניוון עצבי

קח זחלי דרוזופילה כוכב שלישי והרדים אותם באמצעות פחמן דו חמצני.

תחת מיקרוסקופ, מקם את הזחלים כשמשטח הגחון פונה כלפי מעלה כדי לדמיין את העצבים הסגמנטליים.

עצבים אלה מכילים נוירונים מוטוריים המעצבבים את שרירי דופן הגוף ושולטים בתנועת הזחלים.

מסופי האקסון של נוירונים אלה מתחברים לסיבי שריר ליצירת צמתים עצביים-שריריים או NMJs.

הנוירונים משחררים נוירוטרנסמיטורים הנקשרים לקולטנים על סיבי השריר, גורמים לזרם יונים ומעוררים העברת אותות.

בעזרת מלקחיים, צבט את הציפורן הגחונית כדי לפצוע את העצבים הסגמנטליים, ובכך לעכב את התנועה.

הניחו את הזחלים הפגועים על צלחת אגר עם מזון זחלים כדי להבטיח הישרדות.

מניחים את הצלחת בכלי, מכסים אותה במגבת נייר לחה כדי לשמור על לחות, ומאחסנים אותה בכלי כדי לאפשר התאוששות זחלים.

עם הזמן, הפגיעה מובילה למוות של נוירונים מוטוריים, המכונה ניוון עצבי, אשר משבש את ה-NMJs.

הנח כל זחל על מכשיר הרדמה CO₂. תחת מיקרוסקופ מנתח, גלגלו בזהירות כל זחל על הצד הגבי שלו כדי לדמיין את העצבים הסגמנטליים לאורך הציפורן.

חיוני לגלגל בזהירות כל זחל על הצד הגבי שלו על מנת לדמיין את העצבים הסגמנטליים דרך הציפורן לפני הפציעה.

החל מהווים בפה, מקם מלקחיים בגודל 5 בערך חצי עד 2/3 מהדרך לאורך הזחלים. לאחר המיקום, צבט כשליש מהציפורן הגחונית המכילה את העצבים הסגמנטליים עם מלקחיים בגודל 5. כדי להבטיח שהעצבים הסגמנטליים של הזחל ייפגעו, הפעילו מספיק כוח כדי לרסק את העצבים הסגמנטליים, אך השאירו את הציפורן שלמה. כדי לקבוע את כמות הכוח הנכונה, מרסקים 10 זחלים ומוודאים ששיעור התמותה לאחר חמש שעות נמוך מ-50%.

לאחר הפציעה, העבירו בזהירות את הזחלים לצלחת אגר מיץ פירות המכילה כ-0.5 גרם רסק שמרים. מניחים כל זחל כך שהקצה הקדמי שלו יהיה על משחת השמרים להמשך האכלה. מניחים צלחות אגר המכילות רסק שמרים ו -10 זחלים פצועים על תחתית צלחת פטרי ריקה בגודל 100 על 15 מילימטר. מכסים את צלחת הפטרי במגבת נייר לחה, ומוודאים שמגבת הנייר לא תיגע בזחלים או בצלחות האגר. לאחר מכן, הניחו את צלחת הפטרי בכלי אטום בטמפרטורת החדר. לבסוף, אחזר זחלים לדיסקציה לאחר תקופות מוגדרות לאחר הפציעה.