חקירת פגיעה מוחית של זחל זברה באמצעות מיקרוסקופ אלקטרונים סורק בקנה מידה גדול

קחו קטעי מוח דקים במיוחד משובצים בשרף ומקובעים כימית מזחלי דג זברה בריאים ופגועי מוח המותקנים על רשת חור אחד.

החלקים מוכתמים במתכות כבדות כדי לשפר את ניגודיות התמונה במהלך הדמיה מיקרוסקופית.

הנח את הרשת במחזיק דגימה והעביר את המחזיק לתא המיקרוסקופיה.

יישר את הרשת מתחת לאקדח האלקטרונים, שיוצר קרן אלקטרונים.

מערך של עדשות וסלילים אלקטרומגנטיים ממקד את אלומת האלקטרונים על החלקים.

הזיזו את מחזיק הדגימה כדי לסרוק את המקטעים בתבנית רסטר.

כאשר אלומת האלקטרונים עוברת דרך קטעי הרקמה, האזורים הצפופים באלקטרונים המוכתמים מפזרים יותר אלקטרונים, בעוד שהאזורים הלא מוכתמים מעבירים את האלקטרונים.

הגלאי אוסף את אותות האלקטרונים הללו, ויוצר תמונות מוח ברזולוציה גבוהה.

בהשוואה לביקורת, המוח הפגוע מראה מיקרוגליה פגוציטית המכילה תכלילים תוך-תאיים רבים, מאפיין אופייני לניוון עצבי המושרה על ידי פגיעה.

כדי להרכיב את הדגימה במיקרוסקופ האלקטרונים הסורק או SEM, הנח את הרשת מתיבת ההעברה עם הקטע במחזיק הדגימה של הרשת המרובה והעביר אותה לתא של ה-SEM. לאחר יישור הגלאי בהתאם לפרוטוקול הטקסט, הקרין מראש את הדגימה על ידי התרחקות כך שהאזור השלם לסריקה יתאים לחלון התמונה. לאחר שינוי הצמצם ל-120 מיקרומטר וביטול המיקוד של התמונה, השתמש באפשרות סריקת השטח המצומצם כדי להפוך את האזור הסרוק לצפוף ככל האפשר.

לאחר מכן, הגדר