הקמת זיהום HIV פעיל במודל חולדה

התחל עם חולדה מורדמת, חטא את ראשה המגולח ואבטח אותו במנגנון סטריאוטקסי.

בצע חתך בקו האמצע כדי לחשוף את הגולגולת.

סמן שני מיקומים על הגולגולת וקדח חורים קטנים.

חבר מזרק עם נגיפים כימריים המכילים RNA HIV אקוטרופי בתוך וקטור לנטי-ויראלי למנגנון הסטריאוטקסי.

הכניסו את המחט לתוך החור, והתמקדו בתאי קליפת המוח, כולל מיקרוגליה, תאי החיסון של המוח.

הזרקו לאט את הנגיפים להפצתם האחידה בקליפת המוח.

לאחר ההזרקה יש לתפור את החתך, לחטא את האזור ולאפשר לחולדה להתאושש.

הנגיף המוזרק מקיים אינטראקציה עם קולטני תאי המוח, מתמזג ומשחרר RNA HIV לציטופלזמה.

ה-RNA מועתק לאחור ל-DNA ומשתלב ב-DNA של התא.

התא הנגוע מבטא את המרכיבים הנגיפיים, ומייצר RNA וחלבונים חדשים.

אלה מתאספים ומשתחררים כנגיפים חדשים, המגבירים את העומס הנגיפי במוח, ויוצרים זיהום HIV פעיל

.

להזרקת EcoHIV EGFP, לאחר אישור חוסר תגובה לרפלקס הדוושה, יש לגלח את השיער מאזור המוח, ולעקר את העור החשוף פעמיים עם 70% אתנול, וקרצוף על בסיס כלורהקסידין. אבטח את החולדה במצב שכיבה במנגנון סטריאוטקסי, ובצע חתך של 5 עד 6 סנטימטרים דרך העור לאורך קו האמצע של הקרקפת.

סמן עמדת קידוח אחת ברוחב 0.8 מילימטר ואחד 1.2 מילימטר רוסטרל לברגמה, וקדח חור בקוטר 0.4 מילימטר בכל מיקום גולגולת. טען 1.04 כפול 10 עד שישית יחידות התמרה למיליליטר של תמיסת EcoHIV Lentivirus עם טיטרציה למזרק הזרקה של 10 מיקרוליטר, ואבטח את המזרק למנגנון הסטריאוטקסי.

הזז את המחט קרוב לפני השטח של חור קידוח אחד והכנס את המחט 2.5 מילימטרים לתוך החור. להחדיר 1 מיקרוליטר של תמיסת וירוס בקצב של 0.2 מיקרוליטר נגיף לדקה. לאחר שכל הנגיף הוזרק, השאירו את המחט בתוך אזור ההזרקה למשך חמש דקות לפני שתחזירו את המחט לאט לאט עד שהיא מחוץ לגולגולת החולדה.

סגור את חתך העור עם תפר חוט משי 4-0, ועיקר את התמיסה עם 70% אתנול. לאחר מכן, הניחו את החולדה בתא התאוששות עם כרית חימום עם ניטור עד לשכיבה.