מידול דימום הנגרם על ידי תרופות בזחלי דגי זברה

התחל עם צלחת תרבית המכילה עוברי דג זברה מופרים במדיום עוברי.

מקם את הצלחת מתחת למיקרוסקופ סטריאו והשתמש במלקחיים כדי להסיר את הכוריון, הממברנה החיצונית המקיפה את העוברים.

זה מאפשר לעוברים להיחשף למדיום שמסביב.

העבירו את העוברים המפורקים הללו לתוך צלחת המכילה מדיום עוברי עם תרופה המעכבת את סינתזת הכולסטרול, החיונית לשמירה על שלמות כלי הדם במוח.

דגירה בטמפרטורה מבוקרת עד שהעוברים מתפתחים לזחלים.

עם הזמן, התרופה מחלחלת לזחלים המתפתחים, ומעכבת את סינתזת הכולסטרול.

מחסור בכולסטרול מחליש את כלי הדם במוח, גורם להם להיקרע ולדלוף דם למוח, ולפתח כתמים דימומיים.

התבונן בזחלים תחת מיקרוסקופ סטריאו.

הפרד את הזחלים המדממים, עם כתמים אדומים מובהקים, מאוכלוסייה שאינה דימומית.

העבירו את הזחלים הדימומים הללו למנה חדשה למחקרים נוספים.

24 שעות לאחר ההפריה, תחת סטריאומיקרוסקופ בהיר, השתמש במלקחיים חדים במיוחד כדי לפרק עוברים לטיפול באטורבסטטין. לאחר מכן, הוסיפו 30 מיליליטר של מדיום עוברי E3 לשתי צלחות פטרי נקיות, אחת לטיפול והשנייה לבקרה. הסר 60 מיקרוליטר מי עובר מכלי הטיפול, והוסף 60 מיקרוליטר של 0.5 מילי-מולרי אטורבסטטין כדי להשיג 80% מהזחלים מדממים.

בעזרת פיפטת פסטר מעבירים 100 עוברים בכמה שפחות מים לכל צלחת. דגרו את שתי המנות בחום של 28 מעלות צלזיוס. בכל עת לאחר 50 שעות לאחר ההפריה, תחת המיקרוסקופ, השתמשו בפיפטה של פסטר כדי להפריד בזהירות בין דגים מדממים לאוכלוסיות שאינן מדממות ולהעביר את הזחלים לכלים חדשים המכילים מצע E3 טרי.

כדי להקל על הפרדת זחלים חיוביים לדימום, אתה יכול להשתמש בדגים ללא פיגמנט או בדגים המבטאים חלבון פלואורסצנטי בתאי דם אדומים.