מידול ניוון והתחדשות הרשתית בדגי זברה באמצעות פגיעת לייזר מוקדית

התחל עם דג זברה בוגר מורדם.

מעבירים את הדג למחזיק סיכת סיליקון ומורחים שכבה של פולימר סינטטי כדי לשמן את העין.

לאחר מכן, מקם עדשת לייזר מול העין כדי למקד קרן לייזר מכוונת על הרשתית.

כוון את הלייזר אל העין של דג הזברה, וגרם לפגיעה ברשתית.

הלייזר גורם לנזק תרמי ולמוות של תאי קולטני אור ברשתית, ומתחיל תהליך ניווני המתקדם לאורך ימים ומשתרע מהאפיתל הפיגמנטי ברשתית לשכבת הפרספקס החיצונית.

בתגובה, תאי גליה מולר (MG) עוברים גליוזיס תגובתי, והופכים להיפרטרופיים ומתרבים.

לאחר מכן תאים אלה מתמיינים לאבות תאי גזע.

תאי האב נודדים בהדרגה לאתר הפגיעה, ובהנחיית רמזים מרחביים וזמניים מהמיקרו-סביבה, מתמיינים לסוגי תאי רשתית בוגרים במשך מספר ימים, ובכך מקלים על התחדשות מבנה הרשתית.

הכן תמיסת מלאי של חומר הרדמה על ידי המסת 400 מיליגרם אבקת טריקאין ב-97.9 מיליליטר מי מיכל ו-2.1 מיליליטר של TBS טוחנת אחת. התאם ל-pH 7.0 עם טריס טוחנת אחת ב-pH 9. כדי להכין את תמיסת העבודה, יש לדלל את תמיסת ציר הטריקאין 1 עד 25 במי מיכל, ולהעביר 50 מיליליטר לצלחת פטרי. לאחר מכן הכניסו את דג הזברה לתמיסת ההרדמה למשך 2 עד 5 דקות, עד שהם הופכים חסרי תנועה ואינם מגיבים לגירויים חיצוניים.

מעבירים כל דג ביד למחזיק סיכות סיליקון בהתאמה אישית לטיפול בלייזר.

הרדמה מתאימה היא קריטית לרווחת בעל החיים ולהצלחת ההליך. לכן, תמיסת טריקאין שהוכנה טרייה היא מרכזית, וזמן היציאה מהמים לא יעלה בהרבה על 10 דקות.

הגדר את הספק המוצא של לייזר דיודה 532 ננומטר ל-70 מילי-וואט, משך הדופק ל-100 אלפיות השנייה והקוטר האווירי ל-50 מיקרון. לאחר מכן, יש למרוח 1-2 טיפות של 2% הידרוקסיפרופיל מתיל צלולוז על העין.

בעת מריחת מתיל סל על העין, ודא שהתמיסה הצמיגה לא עוברת על הזימים.

לאחר מכן, השתמש בעדשת לייזר פונדוס 2 מילימטר כדי למקד את קרן הלייזר המכוונת על הרשתית. מקם ארבע נקודות לייזר סביב עצב הראייה בעין שמאל, והשתמש בעין הימנית הלא מטופלת כבקרה פנימית.