יצירת מודל מורין עם זיהום במערכת העצבים המרכזית

0 צפיות2:21 דק׳ • July 8th, 2025

התחל עם שני מזרקים מלאים בכמויות שונות של מדיה המכילה את הנגיפים המיועדים לזיהום במערכת העצבים המרכזית (CNS).

שמור את גור העכבר במצב שכיבה. יש לחטא את הראש ולהזריק את הנפח הקטן יותר של תמיסת הנגיף דרך אזור הלמבדה.

זה מאפשר לנגיפים לעקוף את מחסום הדם-מוח ולהגיע ישירות לרקמת המוח.

לאחר מכן, החזק את גור העכבר במצב שכיבה. לחטא ולהזריק את הנפח הגדול יותר של תמיסת הנגיף לבטן.

זה מקל על התפשטות מערכתית של הנגיף דרך כלי הדם, ומדביק חלקים אחרים של מערכת העצבים המרכזית.

הנגיפים המוזרקים נכנסים לתאי עצב ומשתמשים במנגנון מארח כדי להשתכפל, מה שמוביל למוות של תאים.

הנגיפים גם מפעילים את מערכת החיסון, גורמים לדלקת במערכת העצבים המרכזית ויוצרים מודל זיהום במערכת העצבים המרכזית.

לפני תחילת הליך ההדבקה, יש לדלל את מלאי נגיף הדנגי 2 הלא מותאם ל-1 כפול 10 ליחידות יצירת הרובד החמישי לכל 40 מיקרוליטר של RPMI 1640 ריכוז בינוני. לאחר מכן, טען מזרק 10.3 מיליליטר המצויד במחט בגודל 30 עם 10 מיקרוליטר נגיף מדולל ומזרק 10.3 מיליליטר המצויד במחט בגודל 30 עם 30 מיקרוליטר וירוס לכל בעל חיים.

להעברה תוך מוחית של הנגיף, לחץ על האורקל בין האגודל לאצבע המורה כדי לרסן בעדינות עכבר יונק בן שבעה ימים של המכון לחקר הסרטן במצב שכיבה, והזריק את נפח 10 המיקרוליטר של הנגיף המדולל לאזור הלמבדה בצומת התפר הסגיטלי והלמבדואידי. לאחר ההזרקה התוך מוחית, השתמש באגודל ובאצבע המורה כדי להחזיק את העכבר במצב שכיבה ובעדינות תוך צפקית, להזריק את הנפח של 30 מיקרוליטר של הנגיף המדולל לבטן העכברים.