אינדוקציה של אנצפלומיאליטיס אוטואימונית ניסיונית במודל עכבר

התחל בהזרקה תת עורית של תחליב המכיל פפטיד עצבי ואדג'ובנט חיידקי שנהרג בחום לעכבר מורדם.

ברקמה התת עורית, האדג'ובנט מושך תאים מציגי אנטיגן, או APCs, המעבדים ומציגים את הפפטידים העצביים על קומפלקסים עיקריים של תאימות היסטולוגית.

ה-APCs המופעלים מגיעים לבלוטות הלימפה ומקיימים אינטראקציה עם תאי T נאיביים, וגורמים להתמיינות שלהם לתאי T אוטוראקטיביים.

תאי T אלה מסתובבים ומגיעים למחסום הדם-מוח או BBB.

לאחר מכן, הזרקו תוך צפקית אקסוטוקסינים שמקורם בחיידקים.

האקסוטוקסינים מגיעים ל-BBB, מגבירים את חדירותו ומאפשרים חדירת תאי T למערכת העצבים המרכזית (CNS).

במערכת העצבים המרכזית, תאי T מקיימים אינטראקציה עם APCs תושבים המציגים את הפפטיד העצבי, ומקדמים שחרור ציטוקינים הגורם לחדירה נוספת של תאי מערכת החיסון.

תאי החיסון משחררים ציטוקינים מעודדי דלקת, וגורמים לנזק למיאלין.

בנוסף, תאי B מקיימים אינטראקציה עם תאי T ומפרישים נוגדנים עצמיים הפוגעים עוד יותר במיאלין, ויוצרים דלקת מוח אוטואימונית ניסיונית (EAE).

בהליך זה, ממיסים PTX ב-2 מיקרוגרם למיליליטר ב-1x PBS, ומערבבים היטב. לאחר מכן, יש להזריק 100 מיקרוליטר של PLP/CFA לעכברים תת עורית, פעמיים בבסיס הזנב במהלך הרדמה קצרה של איזופלורן. אין להזריק לחלק האחורי של הצוואר, מכיוון שכל תגובה חיסונית בעור בגב העליון או בצוואר תפריע להדמיה של הראש וחוט השדרה.

שעה עד שעתיים לאחר החיסון, יש להזריק 100 מיקרוליטר PTX לעכברים תוך צפק.

לאחר מכן, 24 שעות לאחר החיסון, הזריקו לעכברים שוב 100 מיקרוליטר של PTX. עבור עכברי הביקורת, הזרקו 100 מיקרוליטר CFA ללא PLP פעמיים, בבסיס הזנב.