השראת דלקת עצבית בעכברים באמצעות הזרקת סיבי אלפא-סינוקלאין

מקם עכבר טרנסגני בתנוחה גבית. העכבר מבטא צורה מוטנטית של חלבון אלפא-סינוקלאין, הנוטה לצבירה.

קח תרחיף של סיבי אלפא-סינוקלאין, אגרגטים של חלבון אלפא-סינוקלאין מקופל בצורה לא נכונה.

הזרקו את הסיבים לחלל הצפק כדי לאפשר את הפצתם המערכתית.

ברגע שהם מגיעים לזרם הדם, הסיבים מגיעים למערכת העצבים המרכזית ונקשרים לתאי אנדותל של מחסום הדם-מוח.

הסיבים מועברים דרך שלפוחיות על פני התאים ונכנסים לרקמת העצבים. לאחר מכן הם פולשים לתאי עצב באמצעות אנדוציטוזיס ומקדמים צבירה של חלבוני אלפא-סינוקלאין שעברו מוטציה.

אגרגטים אלה משתחררים על ידי אקסוציטוזיס ומתפשטים לנוירונים שכנים, מיקרוגליה ואסטרוציטים.

זיהוי האגרגטים מפעיל מיקרוגליה לשחרר מיני חמצן תגובתיים, הפוגעים ברקמה, וציטוקינים, המגייסים תאים חיסוניים נוספים. התוצאה היא דלקת עצבית שמובילה למוות של תאים עצביים.

אפשר לעכבר להתאושש כדי להעריך דלקת עצבית בתיווך אלפא-סינוקלאין.

לזריקות תוך-צפקיות, נרקוטי בקצרה את בעלי החיים בתא הרדמה עם איזופלורן. שוב, צבט את הבוהן של החיה וודא שהיא לא מושכת את הגפה האחורית שלה כדי להבטיח הרדמה מתאימה. מלאו מזרק היפודרמי חד פעמי בגודל 27 ב-50 מיקרוליטר של סיבי אלפא-סינוקלאין סוניקטיביים או PBS.

החזיקו את החיה בתנוחת גב, כשהראש פונה הרחק מהחוקר וכלפי מטה בערך ב-45 מעלות. הזרקה ישירה לצפק העכבר מבלי לחדור למעי הדק או לצקום הממוקם מאחורי דופן הבטן. עקוב אחר בעלי חיים עד שיתאוששו מההרדמה.