בידוד צברי חלבונים בלתי מסיסים בדטרגנט מרקמת מוח אנושית לאחר המוות

התחל עם דגימת רקמת מוח אנושית קפואה לאחר המוות ממקרה מאומת של מחלה ניוונית.

כורת חומר אפור עשיר באגרגטים של חלבונים בלתי מסיסים, סימן היכר של המחלה.

העבירו את הרקמה להומוגנייזר.

הוסף מאגר המכיל מעכבים והומוגניזציה כדי לשחרר רכיבים תוך תאיים.

המעכבים חוסמים אנזימי פרוטאז ופוספטאז, ומונעים פירוק חלבונים.

העבירו את ההומוגנאט לצינור והוסיפו מאגר ניקוי יוני. דגירה.

חומר הניקוי מסיס חלבונים מקופלים באופן טבעי, בעוד שאגרגטים חלבונים מקופלים בצורה לא נכונה נשארים שלמים.

סוניקט להשלמת דיסוציאציה תאית.

העבירו את ההומוגנאט לצינור אולטרה-צנטריפוגה וצנטריפוגה במהירות גבוהה.

האגרגטים מתיישבים בתחתית.

הסר את הסופרנטנט המכיל חלבונים מסיסים בחומרי ניקוי.

שטפו את האגרגטים עם מאגר ניקוי יוני, צנטריפוגה והסירו את הסופרנטנט.

הוסף חוצץ אוריאה כדי לנטרל את מצברי החלבון, מה שהופך אותם למסיסים.

העבירו את אגרגטי החלבון המסיסים לצינור וסוניקט קצר כדי להבטיח פירוק מוחלט.

השג רקמת מוח קפואה לאחר המוות מבקרה בריאה ומאושרת פתולוגית לאלצהיימר. השתמש במלקחיים ובסכין גילוח כדי להוציא כ-250 מיליגרם חלקים של חומר אפור מכל דגימת רקמה. אפשרו למקטע המוח להפשיר למשך דקה אחת. כעת, חתכו חתיכת רקמה לקוביות של כשני מילימטרים כשהיא מפשירה. מעבירים לצינור הומוגנייזר מקורר מראש של שני מיליליטר על קרח.

זכור להימנע מחומר לבן ומכל