מדידת פרמטרים מיטוכונדריאלים מרובים בתאי עצב באמצעות זרימה ציטומטרית

0 views • 2:09 min • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

קח נוירונים קבועים וחדירים בצינור.

הוסף מאגר חוסם כדי למנוע קשירת נוגדנים לא ספציפיים.

צנטריפוגה את המתלה והסר את הסופרנטנט. לאחר מכן, השעו מחדש את הנוירונים במאגר.

העבירו את התרחיף באופן שווה לצינורות המכילים נוגדנים ראשוניים לא מתויגים ומתויגים פלואורופור.

דגירה, המאפשרת לנוגדנים להיקשר באופן ספציפי לשרשרת הנשימה המיטוכונדריאלית או לתת-יחידות מורכבות MRC, חלבון הקשור ל-DNA מיטוכונדריאלי וחלבון ממברנה חיצונית מיטוכונדריאלית בתוך הנוירונים.

הסר את כל הנוגדנים הלא קשורים.

דגירה עם נוגדנים משניים מתויגים פלואורופור הנקשרים לנוגדנים הראשוניים הלא מתויגים.

צנטריפוגה את התערובת והשליכו את הסופרנטנט.

השעו מחדש את הנוירונים במאגר והעבירו אותם לצינורות מיקרו-צנטריפוגה.

בצע ציטומטריית זרימה כדי לזהות את האותות הפלואורסצנטיים על הנוירונים המסומנים המתאימים לרמות הביטוי של תת-יחידות מורכבות MRC ולמדידת רמות ה-DNA המיטוכונדריאליות היחסיות.

חסום את הדגימות במיליליטר אחד של מאגר חוסם, ושטוף את התאים על ידי צנטריפוגה עם PBS כפי שהודגם. כדי לזהות קומפלקסים ותת-יחידות מיטוכונדריאליות שונות, דגרו על התאים למשך 30 דקות עם הנוגדנים העיקריים המתאימים המתוארים בכתב היד הטקסטואלי. לאחר שטיפת התאים פעם אחת עם PBS, דגרו את התאים עם נוגדן משני למשך 30 דקות.

בתום הדגירה יש לשטוף ולהשעות מחדש את התאים ב-PBS כפי שהודגם. העבירו את תרחיף התא לצינור מיקרו-צנטריפוגה של 1.5 מיליליטר, שנשמר בחושך, על קרח. לאחר מכן, נתח את התאים על ציטומטר הזרימה וזהה אותות וסנן אחד באמצעות מסנן פס פס 530/30.

12:14

בידוד תזרים Cytometric ניתוח של תאים חיסוניים ממוח עכבר איסכמי

Related Videos

0 Views

09:44

הזרמת כדוריות הדם של מיני חמצן מיטוכונדריאלי מורטין בגזע ובתאי מחולל ולוקמיה מונחה AF9

Related Videos

0 Views

13:53

ניתוח ציטומטרי זרימה של סמנים ביולוגיים אפופטוטיים בתאי סרטן צוואר הרחם SiHa שטופלו ב- Actinomycin D

Related Videos

0 Views

15:09

השימוש בפיברובלסטים אנושיים ראשוניים לניטור פנוטיפים מיטוכונדריאלי בתחום מחלת פרקינסון

Related Videos

0 Views

11:53

Immunodetection של החלבונים בממברנה חיצוניים על ידי cytometry הזרימה של מיטוכונדריה מבודדת

Related Videos

0 Views

07:14

וזמינותו מבוססי Cytometry זרימה מודדים פוטנציאל ממברנה מיטוכונדריאלי של תאי שריר הלב לאחר היפוקסיה/Reoxygenation

Related Videos

0 Views

06:22

כימות מבוססי Cytometry זרימה ססגוניות של המיטוכונדריה, Lysosomes בתאי T

Related Videos

0 Views

07:17

שיפור הדיוק של הערכה להערכת הזרימה של הפוטנציאל לממברנה מיטוכונדריאלי בתאי המטפאות ובתאים באמצעות עיכוב של משאבות אפלוקס

Related Videos

0 Views

10:24

אפיון מרובה של סוגי תאים שאוחזרו ממוח העכבר/חוט השדרה דרך שיטות הומוקות שונות

Related Videos

0 Views

07:57

מדידת מיסת מיטוכונדריאלי ופוטנציאל ממברנה בתאי גזע ותאי T-תאים על ידי זרימה Cy,

Related Videos

0 Views

Last updated: 18 July 2026