צביעה אימונופלואורסצנטית של מוחות דרוזופילה להדמיה חד-תאית של תאי גליה

0 צפיות3:26 דק' • July 8th, 2025

התחל עם מוחות מזבובי דרוזופילה טרנסגניים, המכילים סוגים שונים של תאי גליה המכילים מערכת רקומבינאז ספציפית לתא.

הוא מניע את הביטוי של חלבון פני התא המאוחה לאפיטופים אנטיגניים שונים על אותו סוג תאים.

טפל ברקמה עם קיבוע כדי להצליב חלבונים ולשמר את ארכיטקטורת הרקמה.

שטפו כדי להסיר עודפי קיבוע.

הוסף חלבונים חוסמים כדי להסוות אתרי קשירה לא ספציפיים כדי להפחית את צביעת הרקע.

דגרו על הרקמה עם קוקטייל נוגדנים ראשוני שנקשר לאפיטופים השונים המתבטאים בתאי גליה.

יש לשטוף כדי להסיר נוגדנים ראשוניים לא קשורים.

דגירה עם נוגדנים משניים מצומדים פלואורופור הנקשרים לנוגדנים הראשוניים.

יש לשטוף כדי להסיר נוגדנים משניים לא קשורים.

הרכיבו את המוח בתוך מרווח הדמיה והניחו כיסוי. המרווח יוצר תא לרקמה, ושומר על המבנה התלת מימדי שלה.

תאים שונים מאותו סוג גליה המסומנים בנוגדנים מצומדים פלואורופוריים שונים מאפשרים הבנה של אינטראקציות תא-תא.

העבירו את המוחות המבודדים באמצעות קצה פיפטה P10 לתוך צינור מיקרו-צנטריפוגה בנפח 200 מיקרוליטר עם תמיסה מקבעת. לעולם אל תטפל במוח באמצעות מלקחיים. דגירה על הרקמות המוגנות מפני אור. הימנע משאיבת המוח במהלך העברת תמיסות.

כדי להסיר את הקיבוע, השתמש בשלוש שטיפות או יותר של 15 דקות עם תמיסת כביסה. לאחר מכן, חסום את הרקמות בתמיסת חסימה למשך 30 דקות או יותר. לאחר מכן, החליפו את תמיסת החסימה בנוגדנים ראשוניים מדוללים בתמיסת שטיפה, ודגרו על המוח למשך הלילה ב-4 מעלות צלזיוס.

כדי להסיר את הנוגדנים העיקריים, השתמש בשלוש שטיפות של שעה בתמיסת כביסה. לאחר מכן, הוסיפו נוגדנים מצומדים פלואורופור משניים בתמיסת שטיפה, ודגרו על המוח למשך הלילה ב-4 מעלות צלזיוס, או למשך 4 שעות בטמפרטורת החדר. כדי לשטוף לחלוטין את הנוגדנים הלא קשורים, השתמש בשלוש שטיפות של שעה בתמיסת כביסה, ולאחר מכן שטיפה ארוכה יותר עם PBS.

לאחר מכן, הרכיבו את המוח. הכן שני כיסויים עם מרווח הדמיה. במרווח, ועל הכיסוי הנוסף, יש למרוח 10 מיקרוליטר של מדיום הרכבה עם חומר נגד דהייה. לאחר מכן, בעזרת פיפטה P10, העבירו את המוח לכיסוי, והפקידו אותם ליד המדיום יחד עם כמה PBS. אל תתנו לרקמה להתייבש.

כעת, העבירו בזהירות את המוח למדיום ההרכבה, בעזרת הפיפטה. ולבסוף, העבירו אותם למדיום במרווח וסדרו אותם בעזרת מלקחיים. לאחר מכן, הסר את תוחם הדבק על המרווחים והצמד כיסוי. אבטח את הכיסוי במעט לחץ בעזרת מלקחיים והמשך מיד בהדמיה.

09:20

מרפאוולוגיה רציפה ואימונוהיסטוכימיה על קריוסינות עוברי דג

סרטונים קשורים

0 צפיות

09:12

הדמיה חיה של נדידת תאים גליה את הדיסק העין דמותי תסיסנית

סרטונים קשורים

0 צפיות

05:20

הדמיה של תאי עצב בגוף פטריות במוחות דרוזופילה באמצעות צביעת מערכת החיסון

סרטונים קשורים

0 צפיות

10:33

תיוג של תאים בודדים במערכת העצבים המרכזית של

סרטונים קשורים

0 צפיות

10:10

הקל Sonication Immunofluorescence הכתמה של שלב מאוחר עוברי וזחל

סרטונים קשורים

0 צפיות

09:50

הדמיה חיה של

סרטונים קשורים

0 צפיות

10:13

ניתוח Immunofluorescent מכתים של פטריות הגוף והנפש ומה קולט אור נוירונים במוח למבוגרים דרוזופילה melanogaster

סרטונים קשורים

0 צפיות

08:30

יישום טכניקת FlpOut ססגוניות ללמוד ברזולוציה גבוהה תא בודד מורפולוגיות ו תא אינטראקציות של עכשיו, דונלד ב דרוזופילה

סרטונים קשורים

0 צפיות

08:52

יישומים של קיבוע של רקמות Drosophila עם קרישי פיברין להדמיה חיה

סרטונים קשורים

0 צפיות

07:06

הדמיה של תאים חיים של Drosophila melanogaster מוח זחל כוכב שלישי

סרטונים קשורים

0 צפיות

עודכן לאחרונה: 29 אוגוסט 2026