עיבוד מוח של עכבר לניתוח במורד הזרם

0 views • 4:44 min • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

קח מוח עכבר שזה עתה נקטף והקפיא אותו באיזופנטן מקורר מראש לשימור רקמות מהיר.

לאחר מכן, העבירו את המוח, עם קליפת המוח כלפי מעלה, לתוך מטריצת מוח קפואה כדי לשמור על סביבה קרה במהלך החיתוך.

אפשרו למוח להתאזן לטמפרטורת המטריצה. יישר אותו במטריצה לאורך הסינוסים הסגיטליים והרוחביים כדי להבטיח חתכים סימטריים.

הכנס להבים מקוררים למוח, והבטיח יישור נכון.

לאחר מכן, לחץ עליהם כלפי מטה באופן שווה כדי לקבל חלקי מוח אחידים.

הסר את הלהבים עם החלקים ומקם אותם, עם הצד הרוסטרלי כלפי מעלה, על צלחת זכוכית קפואה.

ארגן את החלקים מכוונת רוסטרל לזנב בסדר האנטומי הנכון. עכשיו, הפרד ביניהם.

באמצעות הפניה מוחית מתאימה, אתר והסר את אזור העניין מהקטע.

העבירו את הרקמה שנכרתה לבקבוקון מקורר מראש לניתוח במורד הזרם.

לאחר הסרת מוחות מעכברי CD-1 בוגרים שהומתו בהמתת חסד, יש להקפיא את הרקמה למשך 60 שניות בחנקן נוזלי או באיזופנטן מקורר מראש בקרח יבש, ולאחסן אותה בטמפרטורה של -80 מעלות צלזיוס.

24 שעות לפני ניתוח הרקמה, הניחו מטריצת מוח נקייה על ערימה של אריזות מקפיא מופשרות, וסנדוויץ' את דפנות המטריצה בין שתי אריזות מקפיא, והקפידו להשאיר כחצי סנטימטר בין החלק התחתון של חריצי הגילוח לחלק העליון של החבילות.

הגדר צלחת זכוכית קפואה לדיסקציה על ידי מילוי קופסה מבודדת בקרח עד כ -5 סנטימטרים מלמעלה. לאחר מכן, הניחו שכבה של 2.5 סנטימטרים של קרח יבש מעל וכסו אותה ביריעות פלסטיק שחורות. הניחו צלחת זכוכית על גבי הפלסטיק וקרח יבש סביב גבולות הצלחת.

הוציאו את מטריצת המוח הקפואה מהמקפיא והכניסו את קליפת המוח כלפי מעלה לתוך המטריצה. הניחו לרקמה להתייצב לטמפרטורה בקופסה למשך 10 דקות, והשאירו את המכסה פתוח במהלך תקופה זו. השתמש במלקחיים קרים כדי להתאים את מיקום המוח במטריצה, כך שהסינוס הסגיטלי והסינוס הרוחבי יתיישרו עם החריצים הניצבים של הבלוק.

ברגע שהמוח נמצא במקומו, הניחו סכין גילוח מקורר ליד מרכזו ולחצו אותו כמילימטר אחד לתוך הרקמה. לאחר מכן, הניחו להב מקורר אחד בכל קצה של המוח ולחצו עד הסוף לתוך המטריצה. לאחר מכן, התחל להוסיף להבים צוננים בקצה הרוסטרלי, הנח אותם בחריצים בזה אחר זה ולחץ אותם בעדינות 1 מילימטר לתוך הרקמה. המשך להוסיף להבים במרווחים של 1 מילימטר, תוך עבודה לכיוון הקצה הזנבי.

כאשר כל הלהבים נמצאים במקומם, לחץ כלפי מטה עם האצבעות, כף היד או חפץ קהה, ונדנד אותם לאט מצד לצד כדי להזיז אותם דרך הרקמה. לאחר שהלהבים הגיעו לתחתית החריצים, אחוז בכל צד של קבוצת הלהבים, ושחרר אותם מהמטריצה על ידי נדנוד קדימה ואחורה.

לאחר שחרור קבוצת הלהבים, הניחו אותם עם הצד הרוסטרלי כלפי מעלה על צלחת הזכוכית, והניחו קרח יבש ליד או מעל הערימה כדי להקפיא עוד יותר את הדגימות להפרדה קלה יותר. לאחר מכן, הניחו את הערימה עם קצוות חדים כלפי מטה והפרידו את הלהבים על ידי הזזת הערימה בין האגודל לאצבעות.

יישר את החלק על לוחות הזכוכית מרוסטרל לזנב, והפריד את הרקמה מהלהבים על ידי כיפוף בין האצבעות או על ידי הפרדתם עם להב מקורר שני. לעיתים, רקמה עלולה להידבק לשני צידי הלהב ויש להקפיד לשמור על כיוון רוסטרל לזנב.

לפני תחילת הניתוח, פתח את אטלס המוח של עכבר אלן או התייחסות אחרת ומצא את ציוני הדרך הדרושים לזיהוי אזורי עניין. השתמש במלקחיים או להבים מקוררים כדי להפוך את הקטע, וודא שאזור העניין עקבי לאורך כל הקטע.

חותכים לתוך החלק בעזרת אזמל נקי או אגרוף, דוחפים את המתכת בעדינות אך בחוזקה לתוך הרקמה, מנענעים אותה קדימה ואחורה כדי לבצע את החיתוך. לאחר קצירת אזור העניין, הנח אותו בצינורות מקוררים מראש של 1.5 מיליליטר, ואחסן אותם בטמפרטורה של -80 מעלות צלזיוס.

09:05

יישום אוטומטי של תמונה מודרך תיקון מהדק לחקר נוירונים של פרוסות המוח

Related Videos

0 Views

06:45

כתמים היסטולוגיים באמצעות קטעי רקמה צפים חופשיים

Related Videos

0 Views

07:36

שילוב של הכלאה פלואורסצנטית באתרו עם אימונוהיסטוכימיה פלואורסצנטית על חלקי מוח טריים של עכברים קפואים או קבועים

Related Videos

0 Views

10:06

Non-לייזר מיקרוסקופית לכידת גישה עבור Microdissection של אזורים במוח דיסקרטית עכבר עבור בידוד RNA סך סידור Downstream הדור הבא והביטוי פרופיל גנטי

Related Videos

0 Views

03:47

קישור צולב של חלבוני משטח עצביים במוח העכבר באמצעות בדיקת קישור צולב כימית

Related Videos

0 Views

03:25

הדמיה של מיטוכונדריה עצבית באמצעות מיקרוסקופ אלקטרונים סורק-פנים סדרתי

Related Videos

0 Views

09:49

מיקרון בקנה מידת רזולוציה אופטית טומוגרפיה של מוח עכבר השלם עם מיקרוסקופית גיליון Confocal אור

Related Videos

0 Views

12:26

שיטה פולשני עבור ההפעלה של הכישור משוננת העכבר על ידי גירוי בתדירות גבוהה

Related Videos

0 Views

09:55

הדמיה תלת מימדי בקנה מידה גדול של ארגון הסלולר קליפת העכבר

Related Videos

0 Views

07:06

אוסף של אזורים קפואים המוח מכרסם עבור ניתוח במורד הזרם

Related Videos

0 Views

Last updated: 1 August 2026