מדידת קצב צריכת החמצן בפרוסות מוח חריפות של עכבר

הניחו אגרופים של פרוסות מוח מעכברים בריאים ונוירודגנרטיביים על מסכי החזקת דגימות.

הפוך את המסכים והכנס אותם לצלחת טישו.

קח מחסנית חיישן מכוילת מראש עם בדיקות חיישן. טען את התרכובות - פירובט, אוליגומיצין, FCCP ואנטימיצין A - לתוך פתחי ההזרקה.

הנח את המחסנית על צלחת הטישו. התחל את הריצה במנתח שטף חוץ-תאי.

הבדיקות מודדות את קצב צריכת החמצן של הפרוסה או (OCR).

עם ההזרקה הראשונה, פירובט נכנס למיטוכונדריה ויוצר נשאי אלקטרונים.

נשאים אלה תורמים אלקטרונים לקומפלקסים I ו-II של שרשרת הובלת האלקטרונים או (ETC), ויוזמים תגובת העברת אלקטרונים המגבירה את צריכת החמצן ואת ה-OCR.

אוליגומיצין מעכב קומפלקס V, עוצר את סינתזת ה-ATP ומפחית את ה-OCR.

FCCP, פרוטונופור, משבש את שיפוע הפרוטונים, מגביר את צריכת החמצן ואת ה-OCR.

אנטימיצין A נקשר לקומפלקס III ועוצר את ה-ETC, מה שממזער את ה-OCR.

השווה את פרופילי זיהוי התווים האופטי (OCR).

ירידה ב-OCR בפרוסות הנוירודגנרטיביות מעידה על פגיעה במיטוכונדריה.

שאבו חתיכה אחת של רקמת מוח מנוקבת, והניחו בזהירות את הרקמה על צד הרשת של מסך הלכידה. חתיכת פלסטיק עגולה עם הרשת מחוברת לצד אחד. בעזרת ממחטת נייר, יבש בעדינות את מסך הלכידה והסר את הלחות, מה שמאפשר לרקמה להיות דביקה ולהיצמד למרכז הרשת.

לאחר מכן, החזק את מסך הלכידה, פורס את הצד כלפי מטה בעזרת פינצטה, והנח אותו באחת הבארות של