מדידות מבוססות עכבה של פלישת תאי סרטן המוח

קח לוחית פלישה ונדידה של תאים המכילה חדרים עליונים ותחתונים.

החדר העליון מכיל קרום מיקרו-נקבובי עם מערך מיקרואלקטרודות זהב למדידת עכבה בתחתיתו. מצפים את הממברנה במטריצה חוץ-תאית או בתמיסת ECM.

מלא את החדר התחתון במדיה בסרום גבוה.

לאחר מכן, הוסף מדיה בסרום נמוך לחדר העליון ודגירה כדי להתאקלם לתנאי התרבית.

הפעל פוטנציאל חשמלי חלש על פני המיקרו-אלקטרודות כדי למדוד את עכבת קו הבסיס.

זרעו תאי סרטן מוח בחדר העליון ואפשרו להם להתיישב על ה-ECM.

המדיה בעלת הסרום הגבוה פועלת כחומר כימו-אטרקטיבי, ומנחה את תנועת התאים אליו.

התאים מפרישים פרוטאזות המפרקות את ה-ECM, ומאפשרות את תנועתם דרך נקבוביות הממברנה לעבר החומר הכימו-אטרקטיבי.

כאשר התאים נודדים, הם נצמדים למיקרו-אלקטרודות, ומגדילים את העכבה התאית.

עם הזמן, יותר תאים נודדים ונצמדים למיקרואלקטרודות, מה שמגדיל עוד יותר את העכבה התאית, המשקפת את הפוטנציאל הפולשני של תאים אלה.

<

p style='background-color:#ffffff;line-height:1.38;margin-bottom:0pt;margin-top:0pt;padding:0pt 0pt 12pt;' dir='ltr'>חמש עד שש שעות לפני ניתוח התאים בזמן אמת, הכנס את מערכת ניתוח התאים בזמן אמת לתוך חממת תרבית התאים. כדי להגדיר בדיקת פלישה, השתמש בפיפטינג הפוך כדי למקם 50 מיקרוליטר של DMEM בתוספת 0.1 מיקרוגרם למיליליטר של ג'ל מטריצה חוץ-תאית

.

מיד לאחר הציפוי, הסר 30 מיקרוליטר מ