השראת מצבים היפוקסיים-איסכמיים ודלקתיים למודל אנצפלופתיה בחולדות טרום לידתיות

קח חולדה בהריון מורדמת עם קרני רחם חיצוניות המכילות עוברים המונחים על גזה לחה.

הנח קליפסים של מפרצת על עורקי הרחם החשופים כדי להגביל את זרימת הדם, כפי שמעיד על הכהיית כלי הרחם.

הגבלה זו גורמת למצבים היפוקסיים-איסכמיים על ידי מניעת חמצן וחומרים מזינים מהעוברים, מה שמוביל לנזק למערכת העצבים המרכזית.

לחות באופן קבוע את קרני הרחם במי מלח סטריליים.

לאחר תקופת החסימה, שטפו את קרני הרחם והסירו את תפסי המפרצת כדי להחזיר את זרימת הדם.

הזריק ליפופוליסכריד או LPS ותערובת צבע למי השפיר של כל שק מי שפיר, תוך שימוש בצבע כדי לאשר את ההזרקה חזותית.

שטפו את קרני הרחם, החזירו אותן לחלל הצפק וסגרו את החתך.

במי השפיר, LPS נקשר לקולטני תאי חיסון, וגורם לשחרור של ציטוקינים פרו-דלקתיים.

ציטוקינים אלה מגיעים למוח העוברי, מפעילים תאי מיקרוגליאה וגורמים לדלקת עצבית, וכתוצאה מכך לנזק מוחי ואנצפלופתיה עוברית.

לאחר בידוד העורקים, הנח קליפ מפרצת חולדה בגודל 30 על כל כלי דם.

לפני מריחת הקליפים, חשוב לוודא שכל הרקמות שמסביב נקיות לחלוטין. בעת הנחת הקליפים, אבטח אותם עם המלקחיים הבוטים ולאחר מכן הנח אותם במקביל. התבוננות בהפסקת הדופק היא קריטית כדי להבטיח איסכמיה היפוקסיה מלאה.

לאחר הנחת כל הקליפים, יש לאשר את הפסקת הפולסים הפרוקסימליים והדיסטליים ואת התכהות כלי הרחם, כולל בשליה הבודדת. לאחר מכן מכסים את כל השדה הניתוחי בגזה, ומשקים את הרקמה במי מלח סטריליים כל 10 דקות למשך שעה. לאחר 60 דקות, הסר את הגזה והשקה שוב את השדה. כאשר קרני הרחם וכלי הדם לחים כראוי, השתמש במלקחיים כדי להסיר בעדינות כל קליפ מפרצת, תוך הקפדה לא לגרום לטראומה לכלי הדם ולשמור על שלמות הרקמה.

כדי לטפל בעוברים עם LPS, השתמש במלקחיים קהים כדי לייצב ולסובב כל שק מי שפיר כך שהבסיס של כל שק מי שפיר בודד יהיה גלוי. לאחר מכן, טען מזרק אינסולין אולטרה-דק אחד של 0.3 מיליליטר עם מחט מחוברת של שמונה מילימטר בגודל 31 עם תמיסת LPS והזריק 100 מיקרוליטר מהתמיסה ממש לפני כל לוחית שליה. עם הסרת המחט, הפעל לחץ ישיר על שק מי השפיר כדי לעצור כל דליפת נוזלים.

החדרת מחט דקה במיוחד בגודל 31 בבסיס שק מי השפיר היא קריטית לאספקת LPS תקינה מבלי לאפשר לאף מי שפיר לברוח.

לאחר השקיית קרני הרחם שלוש פעמים במי מלח סטריליים, השתמש במלקחיים כדי להחזיר את הקרניים לחלל הצפק. לאחר מכן, השתמש בתפר משי רץ 3/0 כדי להעריך מחדש את קצוות שכבת השרירים מבלי לתפור לתוך שק או דרכו, ולאחר מכן לסגור את העור עם תפר משי נוסף 3/0

.