אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מדעי המוח
0 צפיות • 4:47 דק׳ • April 28th, 2025
התחל עם עובר דרוזופילה מנותח מקובע על שקופית זכוכית עם סרט סביבו.
הנוירונים המוטוריים של הזבוב מסומנים באופן פלואורסצנטי לצורך הדמיה.
בעזרת מיקרוסקופ, דמיינו את העובר ומקמו מיקרופיפטה ליפופילית בצבע ירוק-פלואורסצנטי ליד העובר.
לאחר מכן, עבור למצב פלואורסצנטי ואתר את הקצה האקסונלי של הנוירון המוטורי בצומת העצב-שרירי, היכן שהנוירון המוטורי מתחבר לשריר.
עבור למצב brightfield, צור קשר עם קצה אקסון המטרה עם הפיפטה, שחרר טיפת צבע ולאחר מכן דגירה.
בשל אופיים הליפופילי וסביבתם האקסונלית, הצבעים נכנסים באופן סלקטיבי לקרום העשיר בשומנים של האקסון הממוקד.
עם הזמן, הצבע נע לאחור, נע לאחור לאורך שכבת השומן הדו-שכבתית האקסונלית לעבר הגוף העצבי, ומסמן את ההקרנות העצביות.
הסר את הסרט מהשקופית והנח כיסוי.
התבונן בשקופית תחת מיקרוסקופ קונפוקלי.
נוירון המטרה המסומן בנסיגה מופיע בפלואורסצנטיות ירוקה, ומציג מורפולוגיה והקרנות עצביות מפורטות.
השתמש במחט זכוכית מתחת למיקרוסקופ דיסקציה כדי לגרור את העובר החוצה מקרום הוויטלין מהסרט אל הזכוכית, תוך הקפדה לא לפגוע ברקמות הפנימיות של העובר. לאחר מכן חותכים את קו האמצע של עובר בודד על פני השטח שלו מהקצה האחורי לקדמי. הפוך את רקמות האפיתל מהמרכז והצמד את קצה האפידרמיס על פני מגלשת הזכוכית.
השתמש במחט המחוברת לצינור עם פתח קצה של כ-300 מיקרומטר כדי לשאוב או לנשוף או
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים