אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מדעי המוח
0 צפיות • 4:02 דק׳ • April 28th, 2025
התחל עם עכבר טרנסגני מורדם עם חלון הדמיה עגול מזכוכית ולוחית ראש מושתלת על גולגולתו.
תאי המיקרוגליה או החיסון והנוירונים מסומנים בחלבונים פלואורסצנטיים.
לאחר מכן, הצמידו את העכבר לשלב המיקרוסקופ הדו-פוטוני.
לאחר מכן, הזריקו צבע פלואורסצנטי תוך צפקי כדי לצבוע את כלי הדם באדום.
נקה את חלון ההדמיה מזכוכית, החל טיפת מלח והורד את מטרת המיקרוסקופ.
לאחר מכן, הגדר את אור הלייזר כדי ללכוד תמונה של כלי הדם. רשום את תבנית ההסתעפות והקואורדינטות כדי לאתר ולדמות את אותו אזור מאוחר יותר.
כעת, כוונו את הלייזר לעורר את החלבונים הפלואורסצנטיים, מה שגורם למיקרוגליה ולנוירונים להאיר.
באמצעות דפוס ההסתעפות המוקלט, אתר את אותו אזור וצלם באופן קבוע תמונות של תאים.
רשת כלי הדם והנוירונים נשארים יציבים, בעוד ששינויים במיקום המיקרוגליה לאורך זמן משקפים את הדינמיקה החיסונית בתגובה לפעילות עצבית.
קדחו פתח עגול כ-4 מילימטרים לתוך הגולגולת באמצעות מקדח דנטלי. במהלך הקידוח יש להרטיב את הגולגולת באופן קבוע במי מלח סטריליים וצמר גפן כדי לקרר את המוח. נקה שאריות עצם ורכך את עצם הגולגולת.
בסיום, הסר בזהירות את החלק הזה של הגולגולת בעזרת מלקחיים מחודדים. לאחר הסרת הגולגולת, הניחו בזהירות כיסוי קטנה לחה במי מלח בגולגולת. יבש עודפי מלח באמצעות מגבון סטרילי. בעזרת אפליקטור מחודד, מרחו דבק ציאנואקרילט סביב החלון ואפשרו לו ל
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים