אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מדעי המוח
0 צפיות • 3:04 דק׳ • May 29th, 2025
התחל עם פרוסות רקמת מוח קבועות מראש שנאספו משלבים מוקדמים ומאוחרים לאחר הלידה של עכברים.
הפרוסה מכילה נוירונים גרגירי מוח, או CGNs, המבטאים חלבון פלואורסצנטי.
בעזרת מיקרוסקופ קונפוקלי, התמקדו ב-CGN פלואורסצנטי יחיד.
צלם תמונות z-stack בעומקים משתנים כדי ליצור תצוגה תלת-ממדית של הנוירון.
באמצעות תוכנת הדמיה, עקבו אחר הנויריטים או ההקרנות הארוכות של הנוירונים, כולל דנדריטים ואקסונים.
מדוד את אורך הדנדריטים מגוף התא ועד קצהו.
נתח היווצרות טפרים דנדריטיים, מבנים מיוחדים בקצות דנדריטים שבהם מתקבלים אותות מנוירונים אחרים.
כמו כן, העריכו את שטח הפנים והנפח של הנוירון.
בשלב המוקדם שלאחר הלידה, נוירונים מראים מספר מוגבר של דנדריטים, ללא היווצרות טפרים.
בינתיים, בשלב המאוחר שלאחר הלידה, יש פחות דנדריטים, אך אורכם ומספר הטפרים גדלים.
לפיכך, עם הגיל, CGNs עוברים סינפטוגנזה ויוצרים קשרים עם תאים אחרים להעברת אותות.
כדי לחקור את המורפולוגיה של CGNs אלקטרופוטיים בודדים מקטעי מוח סגיטליים של גור הניסוי, צלם תמונות מחסנית z ב-0.5 מיקרומטר לערימה במיקרוסקופ קונפוקלי. דמיין תא אחד לכל חלון תמונה כדי לאפשר ניתוח תמונה קל ושחזור תלת-ממדי. לנתח את אורך הנויריט ואת היווצרות הטפרים הדנדריטיים בצורה עיוורת באמצעות עוקב נויריט פשוט.
העלה תמונות ערימה חד-ערוציות של CGNs אלקטרופוטיים לפיג'י, ולחץ על תוספים, סגמנטציה ו
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים