הדמיה סימולטנית של דינמיקת מיקרוגליה ופעילות עצבית בעכבר ער

נתחיל עם עכבר טרנסגני המאובטח במסגרת סטריאוטקטית, עם חלון גולגולת המושתל מעל קליפת הראייה שלו.

העכבר מבטא EGFP במיקרוגליה ו-R-CaMP, אינדיקטור סידן פלואורסצנטי אדום, בתאי העצב של קליפת הראייה.

מקם את העכבר מתחת למיקרוסקופ של שני פוטונים והתאם את עדשת המטרה כדי להתמקד במשטח המוח.

הזיזו את העכבר עם המסגרת הסטריאוטקטית מעדשת המטרה והצמידו מכשיר הצללה.

מלאו את מכשיר ההצללה במים ומקמו מחדש את העכבר מתחת למיקרוסקופ.

כסו את העדשה בנייר כסף שחור.

מכשיר ההצללה ונייר הכסף חוסמים הפרעות אור חיצוניות, ומבטיחים הדמיה מדויקת.

הנח צג LCD מול עין העכבר כדי לספק גירוי חזותי.

הגדר את פרמטרי ההדמיה והתחל בהדמיה.

גירוי חזותי מעורר עירור עצבי, מה שמוביל לזרם סידן ולעלייה בפלואורסצנטיות R-CaMP.

בינתיים, מיקרוגליה מחזירה את התהליכים שלה תוך כדי אינטראקציה עם נוירונים מופעלים, כפי שנצפה באמצעות הדמיה חיה.

כדי להתקין את מכשיר ההצללה המותאם אישית, וצג LCD לגירוי חזותי, ראשית, מקם את העדשה כדי להתמקד במשטח המוח. ואז הגדר את מיקום העדשה הזה כמיקום z המקורי. שמור על קואורדינטות x ו-y קבועות והעלה את עדשת האובייקטיב. הסר את העכבר והמכשיר הסטריאוטקסי מעדשת האובייקטיב. חבר מכשיר הצללה בחלק העליון של לוחית הראש באמצעות סיליקון, וודא שהמרווח בין לוחית הראש למכשיר ההצללה אטום היטב.

מלאו את מכשיר ההצללה במים מזוקקים. לאחר מכ