אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מדעי המוח
0 צפיות • 4:22 דק׳ • May 29th, 2025
התחל עם גולם דרוזופילה טרנסגני עם עין חשופה.
הניחו את הגולם על חרוז ג'לי בתוך מסגרת נייר מיובשת, מוקפת בטבעת ג'לי.
עין הגולם מכילה חלבוני צומת מתויגים GFP המדגישים את גבולות התא בנוירו-אפיתל של העין המתפתחת.
יש ללחוץ בעדינות על אזור עין הגולם.
תחת מיקרוסקופ פלואורסצנטי, צמתים מתויגים GFP זוהרים, ומציגים את ארגון הנוירו-אפיתל.
צלם תמונות במרווחי זמן קבועים על פני עומקים שונים ועבד את התמונות כדי לשפר את הניגודיות ולמזער רעשי רקע.
יישר את התמונות הללו עם מרווחי זמן הולכים וגדלים כדי לעקוב אחר הנוירואפיתל המתפתח.
בתחילה, תאים ראשוניים יוצרים גבולות סביב אשכולות תאים קולטני אור, בעוד שתאים אינטראומטידיאליים או ICs מתארגנים לשכבה אחת.
מאוחר יותר, המעגלים המשולבים מתמיינים לתאים משניים ושלישוניים ליד קולטני האור.
לבסוף, עודפי ICs מוסרים באמצעות מוות תאי מתוכנת, ויוצרים סריג משושה הבונה את העין המאורגנת.
בעזרת מלקחיים, הרם והסר בזהירות את האופרקולום כדי לחשוף את ראש הגולם. לאחר מכן, קרעו לאורך הצד של מארז הגולם כדי לחשוף את האזור סביב עין אחת. הסר בעדינות את הגולם מסרט ההדבקה.
בנה מסגרת קטנה בגודל 15 מילימטר מרובע מנייר סופג, ונקב חור של 5 מילימטר באמצע. טבלו את המסגרת במים מזוקקים והניחו אותה במרכז שקופית מיקרוסקופ. בעזרת מזרק של 30 סמ"ק, סחטו טבעת אחידה של וזלין כדי להקיף את מסגרת הנייר הספוגה.
ל
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים