אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מדעי המוח
0 צפיות • 4:19 דק׳ • May 29th, 2025
מניחים פרוסת מוח של עכבר קבועה כימית בכלי תחתית זכוכית המכיל חיץ ומאבטחים אותה עם רשת.
חבר אלקטרודה מלאה בצבע פלואורסצנטי אניוני, הידרופילי למקור מתח.
הכנס אלקטרודה קרקעית למאגר כדי להשלים את המעגל החשמלי.
באמצעות תאורת שדה בהיר, קדם את האלקטרודה המלאה בצבע לכיוון הפרוסה.
עבור להדמיית ניגודיות הפרעות דיפרנציאליות אינפרא אדום כדי לאתר אסטרוציטים.
חודרים את סומה האסטרוציטים עם האלקטרודה כדי לגשת לציטופלזמה.
הפעל זרם חשמלי כדי להניע את הצבע לתוך הציטופלזמה באמצעות יונטופורזה.
עבור למיקרוסקופיה קונפוקלית כדי לנטר את תנועת הצבע.
הצבע ההידרופילי, שאינו מסוגל לחצות את הממברנה ההידרופובית, מתפזר בתוך הציטופלזמה כדי למלא את הסומה והענפים.
לאחר מילוי התא, עצור את הזרם ומשוך את האלקטרודה.
אפשרו לקרום האסטרוציטים לאטום מחדש.
רכוש תמונות במישורי Z שונים ושחזר אותן כדי להמחיש מורפולוגיה של אסטרוציטים.
לבדיקת הזרקת הצבע, הניחו בעדינות פרוסת מוח קבועה קלות לתוך צלחת תחתית זכוכית מלאה ב-0.1 PBS מולארי בטמפרטורת החדר. והחזק את הפרוסה במקומה בעזרת נבל פלטינה עם מיתרי ניילון.
חבר את האלקטרודה למקור מתח והנח את האלקטרודה הקרקעית לאמבטיה המכילה את פרוסת המוח. העבר את המטרה של מיקרוסקופ קונפוקלי לאזור המוח המעניין.
והורד את האלקטרודה לתמיסה באמצעות עדשת הטבילה במים פי 10, והעביר את האלקטרודה למרכז שדה הראייה. לאחר מ
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים