אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מדעי המוח
0 צפיות • 3:08 דק׳ • May 29th, 2025
התחל עם מכסה צלחת פטרי המכיל את מוח הזחל של דרוזופילה, שנחשף מראש למחזור אור/חושך. הפרוסה מכילה נוירוני שעון המבטאים חלבון פלואורסצנטי.
הוסיפו מדיום עשיר בחומרים מזינים עם אנטיביוטיקה לתמיכה בהישרדות תאי העצב ותמיסת פיברינוגן חמה.
ערבבו בעדינות את התמיסה כדי לפזר פיברינוגן באופן שווה.
הניחו כמות קטנה של תערובת זו על המכסה של צלחת עם תחתית זכוכית.
הוסיפו תרומבין כדי להגיב עם פיברינוגן כדי לגרום להיווצרות מטריצת פיברין תלת מימדית.
העבירו את המוח למטריצה זו, ומקמו אותה עם הצד הקדמי כלפי מטה כדי ליישר את נוירוני השעון לצורך הדמיה.
קפלו את המטריצה מעל המוח כדי לעגן אותה ולמנוע תנועה.
הוסיפו מדיום עשיר בחומרים מזינים כדי לנטרל את פעילות התרומבין.
אטמו את הצלחת עם ממברנה חדירה לגז כדי לשמור על הידרציה וחיוניות עצבית.
בצעו הדמיה פלואורסצנטית דולג זמן במרווחי זמן ספציפיים.
השינויים הקרינה בנוירוני השעון חושפים את ההפעלה והעיכוב הריתמיים שלהם, מסונכרנים עם מחזור האור/חושך, ומשקפים את השעון הביולוגי, מחזור הפעילות היומי.
לאחר העברת המוח לתמיסה עובדת, יש להוציא את המוח והמדיום על מכסה של צלחת פטרי סטרילית. לאחר מכן הוסיפו עוד 3.5 מיקרוליטר של SAM עם אנטיביוטיקה, והוסיפו 3.5 מיקרוליטר של SAM חם עם פיברינוגן.
חשוב לשמור על מדיום ה-SAM עם פיברינוגן ב-37 מעלות לאורך כל הליך זה.
לאחר מכן, ערבבו את התמ
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים